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中药质量标准是中药发展的关键问题,质量标准是评价中药质量的基本依据,中药质量优劣直接关系到中医临床用药的安全和疗效,因此,建立科学合理且符合中药特征的质量标准是中药产业发展的必然要求。本文以黄芪口服液(原名黄芪精)和黄杨宁片原料环维黄杨星D为研究对象,对环维黄杨星D的质量标准中的难度较高的关键控制项-含量测定进行了准确性更高的新方法开发,对黄芪精的现行质量标准提高进行了研究。本文建立了黄杨宁片原料环维黄杨星D的含量测定方法,采用高效液相色谱-电喷雾检测(HPLC-CAD)法对3个厂家共12批黄杨宁片原料中环维黄杨星D及有关物质进行定量分析,酰胺基色谱柱分离;乙腈-100mM甲酸铵溶液(85:15)(混合溶液用甲酸调pH=2.8)为流动相等度洗脱,流速1.1ml/min,柱温30℃;CAD雾化温度35℃,气压62.2psi;结果:新建立的方法能检测到除环维黄杨星D外的5个有关物质。结果,专属性试验表明阴性无干扰;平均回收率为95.74%,RSD为1.79%(n=6);重复性试验平均含量为84.81%,含量RSD为1.79%。三个厂家12批原料样品中环维黄杨星D含量为79.94%～88.49%,平均值82.20%。CAD对非挥发性物质具有响应均一性,以环维黄杨星D作为对照品外标法计算5个有关物质含量,结果在15.99%～22.15%,平均值20.10%。采用了 HPLC-Q-Exactive对黄杨宁片原料中5个有关物质进行定性研究,离子源为电喷雾离子源(ESI),分析模式为正离子模式。通过对5个有关物质一级质谱、二级质谱数据分析,推测5个有关物质分别是环常绿黄杨碱C(有关物质1)、环黄杨碱D双键加氢产物(有关物质2和4)、环黄杨碱D(有关物质3)、Cyclobuxamine H(有关物质5)。黄芪口服液的质量标准提高研究包括命名、处方制法、性状、薄层鉴别、含量测定、指纹图谱这六个方面内容。样品来自4个厂家共20批。根据国家中成药命名原则将原名黄芪精更名为黄芪口服液。补充了处方和制法项。修订了黄芪的薄层鉴别方法,增加了黄芪对照药材鉴别;改善了展开剂条件,使各斑点比移值更合适。采用HPLC-ELSD法测定样品中黄芪甲苷的含量,色谱柱为C18;以乙腈-水(32:68)为流动相,等度洗脱;理论塔板数计算不得低于8000;结果:专属性试验阴性无干扰;黄芪甲苷平均回收率为95.56%,RSD为1.88%;重复性试验平均含量为0.225mg/ml,含量的RSD为1.27%;黄芪甲苷含量在0.113～0.402mg/ml,其含量限度沿用原标准本品每1ml含黄芪甲苗应不少于0.02mg。采用HPLC-UV法同时测定样品中毛蕊异黄酮苷、刺芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素的含量。色谱柱为C18;流动相为甲醇-水,梯度洗脱;检测波长254nm;结果:专属性试验阴性均无干扰;毛蕊异黄酮苷、刺芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素平均回收率分别为 106.56%、94.45%、100.21%、93.73%,RSD 分别为 0.33%、0.95%、0.78%、0.36%;重复性试验平均含量分别为0.071、0.019、0.051、0.010mg/ml,含量的RSD分别为0.24%、0.33%、0.22%、0.60%;4 种黄酮类成分含量分别为 0.0813、0.0226、0.0238、0.0060mg/ml。芒柄花黄素含量较低且有部分批次没有检测到,故不列入标准草案,其余3种黄酮列入标准草案,3种黄酮总含量范围在0.0148～0.3705mg/ml,平均含量为0.1277mg/ml,含量限度3种黄酮总量不得少于0.10mg/ml。采用HPLC-UV法建立黄芪口服液的指纹图谱,为具代表性和公正性,以4个厂家中每个厂家3批样品生成对照指纹图谱,计算20批样品相似度。色谱柱C18;流动相为甲醇-水,梯度洗脱;检测波长225nm。结果:20批样品相似度在0.464(1)～0.704～0.978,相似度平均值为0.847。在此基础上应用高效液相色谱-质谱(HPLC-Q-TOF)联用技术,离子源为电喷雾离子源(ESI),在正、负离子检测模式下,对黄芪口服液指纹图谱中的色谱峰进行了定性分析。推测5个未知峰的身份,分别为美迪紫檀烷苷、黄芪异黄烷苷、对羟基苯甲酸乙酯、3-羟基-9-10-二甲氧基紫檀烷、7,2’-二羟基-3’,4’-二甲基异黄烷。此外,4个厂家的样品相似度差异较大,且同一个厂家相似度批间差异大于4个厂家间。因此采用主成分分析(PCA)和偏最小二乘判别分析(PLS-DA)对指纹图谱共有峰进行数据分析,PCA将20批样品分成3大类,其中有两个厂家样品被分成了不同类,采用PLS-DA筛选出毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷这两个差异性成分,表明这两个化合物是上述3种类型之间产生差异的主要标志性成分,提示厂家在药品生产过程需要关注以上两种成分。