大肠癌是世界范围内发病率及死亡率均位居前三位的恶性肿瘤,手术联合化疗仍是最主要的治疗手段。而肿瘤耐药对大肠癌患者的治疗是一个严峻的挑战,提高对肿瘤耐药机制的认识可能有助于改善患者的预后。肠道菌群与宿主的肠道慢性炎症和癌变密切相关,致病性肠菌具核梭杆菌在大肠癌发生发展过程中的重要作用也日益引起关注。在本课题的前期研究中,我们拟探讨肠道菌群是否参与大肠癌细胞化疗耐药。通过对大肠癌多个临床队列的组织标本进行分析,我们发现具核梭杆菌的丰度在化疗后复发组患者中明显高于未复发组,且其丰度与患者的无复发生存期密切相关,或可作为预测患者预后的独立风险因子。通过生物信息学和功能学研究,我们发现具核梭杆菌可促进大肠癌细胞的化疗耐药。利用具核梭杆菌感染大肠癌细胞,通过蛋白免疫印迹、共聚焦显微镜及透射电镜检测自噬情况,并分别加入化疗药物奥沙利铂、5-Fu和自噬抑制剂氯喹后,通过细胞增殖、细胞凋亡、免疫印迹分析等方法检测大肠癌细胞的耐药情况,并构建裸鼠移植瘤模型进行体内验证,结果表明,具核梭杆菌可通过激活细胞自噬而抑制化疗药物介导的细胞凋亡,促进大肠癌细胞对化疗药物产生耐药。进一步探究发现具核梭杆菌介导TLR4-MYD88通路激活细胞自噬通路。综上,我们分别从临床样本、体外实验、体内实验多方面证实具核梭杆菌可影响大肠癌细胞的化疗耐药,与大肠癌患者的预后不良显著相关。若能进一步开发针对具核梭杆菌及相关分子的检测和靶向干预方法,将对大肠癌的临床治疗提供一定的指导意义。代谢重编程是肿瘤区别于正常组织的生物学特征之一,近年来研究表明肿瘤的代谢水平变化（如糖代谢）受多种因素影响,其中肠道菌群的作用引起我们的关注。结合前期工作,本课题的后期研究将阐明具核梭杆菌是否及如何影响大肠癌细胞的糖代谢重编程。通过对具核梭杆菌干预后的大肠癌细胞系进行靶向代谢质谱检测,我们发现具核梭杆菌可促进大肠癌细胞的糖酵解过程。一系列功能学实验表明,具核梭杆菌可促进大肠癌细胞葡萄糖摄取及乳酸生成,并促进大肠癌细胞增殖。通过深入探究分子机制,我们发现具核梭杆菌可能通过上调长链非编码RNA ENO1-IT1而促进糖代谢关键酶（如ENO1）的转录,从而促进大肠癌细胞糖酵解过程;而进一步研究发现ENO1-IT1有可能通过募集组蛋白乙酰转移酶KAT7,而促进靶基因启动子区的H3K27Ace富集,继而激活ENO1基因的转录。基于此,我们首次发现肠道致病菌之一的具核梭杆菌可影响大肠癌细胞的糖代谢重编程,进而促进肿瘤细胞增殖。本课题的研究将有助于深入探究肠道微生物对大肠癌发生发展的调控机制,也有助于为早期诊断和预后预测提供有效的生物标志物,并将对大肠癌的治疗提供潜在的干预靶点。