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本文以孔鳐(Raja porosa)软骨及泥蚶(Tegillarca granosa)为实验材料。孔鳐软骨采用盐酸胍抽提、透析、丙酮分级沉淀,获得软骨蛋白组分;泥蚶去壳取肉,匀浆。两者采用酶解、超滤、DEAE-52阴离子交换层析、Sephadex G-15凝胶层析和反相高效液相色谱(RP-HPLC)等技术,分别得到了孔鳐软骨多肽和泥蚶多肽,并对其抗氧化活性和抗肿瘤活性进行了研究。(1)孔鳐软骨蛋白经胰蛋白酶酶解和分离纯化得到3个活性多肽(DCPE-A,DCPE-B和DCPE-C),经氨基酸序列分析和质谱(ESI-MS)确定其结构分别为Phe-Ile-Met-Gly-Pro-Tyr(DCPE-A)和Gly-Pro-Ala-Gly-Asp-Tyr(DCPE-B)和Ile-Val-Ala-Gly-Pro-Gln(DCPE-C),分子量分别为726.9、578.58和583.69 Da。体外抗氧化实验结果表明:DCPE-A、DCPE-B与DCPE-C对DPPH自由基(EC50为3.83、4.21和4.45 mg/l)、羟自由基(EC50为3.37、3.92和4.23 mg/m L)、ABTS自由基(EC50为0.77、1.04和1.29 mg/m L)和超氧阴离子自由基(EC50为1.61、1.66和1.82 mg/m L)具有良好的清除作用,DCPE-C亦显示出了良好的脂质过氧化抑制作用。抗肿瘤活性表明:孔鳐软骨多肽DCPE-A,DCPE-B和DCPE-C的对人宫颈癌He La细胞的半数抑制率(IC50)分别为4.81、4.86和6.26 mg/m L,DCPE-A显示出最强的增殖抑制作用。AO/EB染色观察显示DCPE-A能引起肿瘤细胞凋亡的形态学变化;通过流式细胞术结果可以看出随DCPE-A浓度的增加,He La细胞的早期凋亡率从4.54%增加到19.25%;Western blotting免疫印迹表明Bcl-2/Bax的比值急剧升高,且Caspase-3的蛋白表达水平也显著增加。研究结果表明软骨多肽DCPE-A可诱导He La细胞发生凋亡,为其应用于临床肿瘤治疗提供理论依据。(2)泥蚶经胰蛋白酶酶解和分离纯化得到2个活性多肽Trp-Pro-Pro(BCP-A)和Gln-Pro(BCP-B),分子量分别为398.44和243.23 Da。体外抗氧化实验结果表明:BCP-A和BCP-B对DPPH自由基(EC50 1.39和3.52 mg/m L)、羟自由基(EC50 0.41和1.75 mg/m L)、ABTS自由基(EC50 0.32和1.41 mg/m L)和超氧阴离子自由基(EC500.54和1.12 mg/m L)具有良好的清除作用。BCP-A比BCP-B具有更强的抗脂质过氧化能力。抗肿瘤活性表明:泥蚶多肽BCP-A对前列腺癌PC-3细胞增殖抑制作用高于前列腺癌DU-145细胞、肺癌H-1299细胞和宫颈癌He La细胞,IC50分别为1.99、2.80、3.3和2.54 mg/m L。AO/EB染色观察显示BCP-A能引起肿瘤细胞凋亡的形态学变化;通过流式细胞术结果可以看出,随BCP-A浓度的增加,PC-3细胞的早期凋亡率从5.14%增加到20.28%。结果表明泥蚶多肽BCP-A可诱导人前列腺癌PC-3细胞发生凋亡,可作为抗氧化和抗癌制剂用于食品与药学产业。