论文部分内容阅读
目的：本研究基于导师史锁芳教授临床配伍运用大剂量甘草治疗哮喘取得较好疗效的基础,从实验角度进一步验证不同剂量炙甘草对OVA致大鼠哮喘模型症状积分、气道反应性、支气管病理、血清细胞因子、肺组织pSTAT-6免疫组化及肺组织STAT-6、 commonSTAT-6、STAT-6c RT-PCR表达的影响。一方面,通过观察炙甘草对哮喘的治疗作用,试析炙甘草治疗哮喘的作用机理；另一方面,为导师善于运用大剂量甘草治疗哮喘提供分子生物学佐证,也为藉“量效关系”理论提高平喘疗效提供实验依据。方法：清洁级雄性SD大鼠50只,随机分为：空白组(Control group)、哮喘模型组(OVAgroup)、泼尼松组(Prednisone group)、炙甘草低剂量组(Low dose glycyrrhizae decoction group)、炙甘草高剂量组(High dose glycyrrhizae decoction group),每组10只。除空白组外,其余各组通过腹腔注射OVA、AlO3H3、灭活百日咳杆菌致敏,及OVA雾化诱喘,建立哮喘大鼠模型；空白组给予生理盐水腹腔注射及蒸馏水雾化作为对照。建立模型后,各组分别给予相应的药物灌胃。通过哮喘行为学评分评估模型症状,乙酰胆碱雾化诱喘间接评价气道反应性,肺组织HE染色观察病理损伤程度,ELISA法检测血清IgE、IL-13、 IFN-γ浓度变化,通过免疫组化了解肺组织pSTAT-6表达,RT-PCR检测STAT-6、 common、TAT-6、STAT-6c的表达情况。结果：①本实验采用的方法所建立的大鼠哮喘模型符合哮喘动物模型的基本特点,我们认为本模型符合要求；②统计分析数据显示：炙甘草高剂量组能显著改善哮喘大鼠的症状、降低气道反应性,同时改善支气管病理损伤,疗效显著优于炙甘草低剂量组及哮喘模型组；③炙甘草高剂量组大鼠血清IgE、IL-13水平较哮喘模型组降低,IFN-γ浓度较哮喘模型组升高均显示出明显的差异,炙甘草低剂量组与哮喘模型组比较差异不显；④免疫组化结果显示：炙甘草高剂量组pSTAT-6的表达与哮喘模型组比较具有显著的抑制作用,炙甘草低剂量组与哮喘模型组比较则未能显示出统计学差异；⑤STAT-6不同亚型的RT-PCR结果显示：炙甘草高剂量组对STAT-6的表达具有显著的抑制作用,其上调STAT-6c,下调STAT-6、 common STAT-6的作用较哮喘模型组均有显著差异,而炙甘草低剂量组对STAT-6不同亚型的表达与模型组比较差异不显。结论：①炙甘草在高剂量时具有改善哮喘症状、降低气道反应性、减轻哮喘气道病理损伤,抑制IgE、IL-13生成,促进IFN-Y产生,降低肺组织pSTAT-6表达,上调STAT-6c,下调STAT-6、common STAT-6的作用。②炙甘草治疗哮喘的作用与其能调节STAT-6的转录,增强抑制性STAT-6c表达,抑制STAT-6表达,降低IgE水平,调节Th1/Th2免疫应答有关。③炙甘草自身的性味归经及功效是其治疗哮病的基础,其调和缓急作用在哮病的综合治疗中发挥了重要作用。④本研究结果为导师敢于运用大剂量甘草治喘提供了分子生物学佐证,也为运用“量效关系”理论,适当加大平喘药物剂量以提高平喘效果提供了实验依据。