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临床实践表明：口腔颌面部恶性肿瘤(鼻咽癌、口腔癌和咽喉癌)患者，经放射治疗后，往往损伤唾液腺导致进行性唾液分泌减少，出现口干症状，其临床表现与干燥综合征(Sjogren‘s syndrome,SS)十分类似。干燥综合征(SS)是一类慢性自身免疫性疾病。病因学研究发现：水通道蛋白5(AQP5)的合成和表达异常与SS的发病密切相关,其表达降低是导致SS唾液分泌异常的重要原因。有研究表明：DNA甲基化参与了AQP5表达调控，是AQP5基因表达受抑的重要机制。去甲基化酶(MBD2)是DNA甲基化的重要组成部分。具有甲基化沉默能力的基因,又具去甲基化酶活性的DNA甲基化调控蛋白,在多种肿瘤的表观遗传学调控中扮演着重要角色。经生物学软件测试分析，作为甲基化体系中的重要组成部分，去甲基化酶MBD2(methyl-CpG binding domain2)可以调控AQP5甲基化状态，但参与AQP5表达调控及其机制尚不清楚。目的：为验证MBD2与AQP5的分子调控关系。建立辐射致伤颌下腺细胞(humansubmandibular gland，HSG)模型，通过MBD2调控途径，定向控制和调高AQP5的合成与表达，初步探讨MBD2在AQP5表达调控中的相互作用及调控机理，为干燥综合征的临床治疗提供新的视角。方法：在前期AQP5和SS相关研究及生物信息学测试分析的基础上，本课题在分子、细胞的层次研究二者关系。首先，通过构建电离辐射致伤人颌下腺(humansubmandibular gland，HSG)细胞模型。利用免疫荧光、RT-PCR、western-blot的方法检测HSG细胞系在辐射前后AQP5的差异表达。然后，通过构建MBD2腺病毒过表达载体并转染到HSG细胞系中，为了证明MBD2对AQP5的调控关系，利用RT-PCR、western-blot的方法验证AQP5的表达水平的变化。结果：1、成功构建电离辐射致伤人颌下腺(human submandibular gland，HSG)细胞模型。2、通过RT-PCR、western-blot、免疫荧光的方法证明：AQP5在60钴γ射线辐射后，无论是其mRNA水平，还是蛋白质水平的表达都会被抑制。3、成功构建MBD2的腺病毒表达载体。4、在HSG细胞系中，MBD2能够促进AQP5的表达。本实验，通过对HSG细胞模型的研究，以RT-PCR、免疫荧光技术、蛋白印迹技术研究AQP5在不同条件下的表达水平。初步判定MBD2与AQP5的表达关系。在后续实验中，借助于双荧光启动子报告系统、EMSA、染色质免疫沉淀(CHIP)等方法检测MBD2参与AQP5表达模式，深入探讨MBD2在AQP5表达调控中的相互作用及调控机理，为进一步以去甲基化角度针对AQP5展开SS的治疗提供理论和实验依据。