食品中双酚A电化学免疫传感检测方法的建立

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双酚A(BPA)是一种塑化剂,也是一种环境雌激素。BPA可由食品包装材料迁移到食品中,继而被摄食进入人体,长期积累可造成健康损害。因此建立食品中BPA的有效检测方法具有重要意义。论文制备了两种BPA完全抗原,通过动物免疫制备了两种BPA多克隆抗体。采用酶联免疫吸附测定法筛选对BPA具有较好特异性识别能力的抗血清,纯化该抗血清得到BPA抗体用于BPA免疫传感检测方法的建立。将BPA抗体固定在传感器电极上,利用抗原抗体特异性结合力捕获样品中的BPA,采用循环伏安法检测体系产生的氧化还原电化学信号,在电极表面通过电沉积方法修饰纳米金做为信号增敏系统来增加电极灵敏度,系统优化了影响检测结果的反应条件。优化后电化学免疫传感检测工作条件为:抗体最适浓度为100 μg/mL,抗体缓冲液的pH值为7.4;酶标抗原的最适浓度为10 μg/mL,最适反应时间为1 h;工作电解液的溶剂选择pH 7.4磷酸盐缓冲液,工作电解液中氧化剂双氧水的浓度为4.20 μg/mL。该方法在磷酸盐缓冲液中的检测限为4.00 μg/L。将所建立的方法用于食品样品(纯净水、黄桃罐头、豆豉鲮鱼罐头、午餐肉罐头)中BPA的检测,优化了样品基质影响消除方法。罐头样品中BPA的检出限为8.00 μg/kg,水样品中BPA的检出限为4μg/L。BPA的添加回收率为79.10~115.88%,变异系数为0.22~15.46%。采用高效液相色谱法对建立电化学免疫传感检测方法进行验证,两种方法检测结果的一致性R2=0.9717,证明建立的BPA电化学免疫传感检测方法的准确性好、精密度高,可用于多种罐头食品及水样中BPA的有效检测。
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