【摘 要】
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禽致病性大肠杆菌对畜禽养殖业的发展危害巨大,是重要的公共卫生学问题之一。乳酸菌是广泛存在于人和动物体内的有益微生物,是肠道的优势菌群,具有加强动物自身免疫功能、促进动生长等作用。乳酸菌复合制剂对病原菌感染家禽具有一定的防治作用,对保障家禽健康养殖和动物性食品质量与安全具有重要的意义。本研究从鸭肠道内分离鸭源的乳酸菌,通过抑菌活性及抗逆性等试验筛选益生作用较好的乳酸菌菌株,制成乳酸菌复合制剂,研究了
【基金项目】
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安徽省科技攻关项目,绿色生态畜禽产品产业链质量安全控制技术集成与示范项目编号:1604a0702033
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禽致病性大肠杆菌对畜禽养殖业的发展危害巨大,是重要的公共卫生学问题之一。乳酸菌是广泛存在于人和动物体内的有益微生物,是肠道的优势菌群,具有加强动物自身免疫功能、促进动生长等作用。乳酸菌复合制剂对病原菌感染家禽具有一定的防治作用,对保障家禽健康养殖和动物性食品质量与安全具有重要的意义。本研究从鸭肠道内分离鸭源的乳酸菌,通过抑菌活性及抗逆性等试验筛选益生作用较好的乳酸菌菌株,制成乳酸菌复合制剂,研究了该复合制剂对樱桃谷鸭在禽致病性大肠杆菌17(Avian pathogenic E.coli 17,AE17)感染条件下生长性能、免疫发育和肠道菌群的影响。本研究旨在从肉鸭养殖环节防治病原菌大肠杆菌的感染,为家禽绿色健康养殖提供依据和保障。1.鸭肠源乳酸菌的筛选及其复合制剂的制备自健康成年鸭肠道中分离得到23株乳酸菌。经耐胆盐、耐人工胃液筛选出7株(编号:L531、L621、E5、L522、L3、L4、E1)耐受性较强的菌株;通过耐热性、表面疏水性、自聚合能力、与病原菌共凝集能力、体外拮抗致病菌等实验筛选,筛选出L4、L621两株菌与实验室前期筛选的活性较好的干酪乳杆菌1.2435复配制成乳酸菌复合制剂。根据抑菌活性特性,确定三株乳酸菌(1.2435,L621,L4)最适比例为1:1:2,通过对接种量和发酵时间的筛选,确定在1%的接种量和发酵时间为14h时复合制剂抑菌活性最强。2.鸭肠源乳酸菌复合制剂对大肠杆菌AE17感染樱桃谷鸭生长性能、免疫性能的影响160只1日龄的樱桃谷鸭随机分为对照组(CK组)、乳酸菌复合制剂组(T组)、对照攻毒组(CK-AE17组)、乳酸菌复合制剂攻毒组(T-AE17组)。CK组和CK-AE17组饲喂基础日粮,T组和T-AE17组从1日龄开始灌喂乳酸菌复合制剂(1.5×108CFU/m L),CK-AE17组和T-AE17组14日龄腿部肌肉注射感染大肠杆菌AE17。生长性能的结果表明,T组末体重最高、平均日增重与CK组比较提高了6.93%,料重比降低了0.89%。免疫性能的结果发现,T组脾脏指数、胸腺指数、法氏囊指数分别较CK组提高了25%、11.11%和6.25%。T组肠道黏膜SIg A的分泌量为1.77,显著的高于CK组的1.56(P<0.05)。T-AE17组的分泌量2.16高于CK-AE17组的2.00。说明乳酸菌复合制剂对生长性能有促进作用,能够提高免疫器官指数,感染大肠杆菌AE17时可以提高肠道黏膜分泌型免疫球蛋白A(SIg A)的分泌。3.高通量测序技术分析乳酸菌复合制剂对大肠杆菌AE17感染樱桃谷鸭肠道菌群物种组成和功能的影响对樱桃谷鸭盲肠肠道内容物进行肠道菌群16S r RNA扩增子测序,T组肠道菌群多样性指数高于CK组。门水平微生物群落结构分析显示4组优势菌门(丰度低于1%合并)均为Bacteroidetes和Firmicutes。属水平微生物结构分析显示乳酸菌复合制剂增加肠道菌群丰富度的同时降低了肠道内大肠埃希菌属等致病菌的相对丰富度。根据16S rRNA扩增子测序结果进行宏基因组测序,对肠道菌群的宏基因组测序结果分析发现,符合微生态制剂饲喂后能显著改变AE17感染状态下肠道菌群结构,显著降低Firmicutes/Bacteroidetes比率,提高与“细胞周期调控、细胞分裂、氨基酸的转运和代谢、碳水化合物的运输和代谢、转录、复制、重组和修复”等有关功能基因丰度,同时在防御机制中,通过COG功能注释到基因丰度在CK-AE17组和T-AE17组中比未攻毒的CK组和T组高。乳酸菌复合制剂具有较好的生理活性,能够提高樱桃谷鸭的生长性能、免疫性能,增加了肠道内肠道菌群的多样性和丰富度,增加了有益菌,减少了致病菌数量,主要参与机体碳水化合物代谢和氨基酸代谢等。
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