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目的:研究复方茵陈脂肝颗粒(ACF)治疗非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的作用,并探讨其作用机制,为该药物的临床应用奠定实验基础。方法:体内实验:将成年雄性SD大鼠72只,随机分成对照组12只、模型组60只,对照组以基础饲料喂养,模型组采用高脂饲料喂养方法复制大鼠NAFLD动物模型。8周后将模型组60只大鼠随机分为5组,即模型组、复方蛋氨酸胆碱组、ACF低剂量组、ACF中剂量组、ACF高剂量组,继续予以高脂饲料喂养。对照组、模型组分别按10ml/kg·d-1灌服生理盐水,复方蛋氨酸胆碱组按0.24g/kg-d-1灌胃给药,ACF低、中、高剂量组分别按0.462g/kg-d-1、0.924g/kg·d-1及1.848g/kg-d-1灌胃给药,给药期间,每周称重1次以调整给药量,给药30d后取材;称量各组大鼠体重、肝组织湿重,计算各组肝指数;HE染色观察肝组织病理学改变;生化比色法检测血清中ALT、AST、TG、TC、HDL-C、 LDL-C的含量;Real time-PCR检测大鼠肝组织中miR-122的表达;RT-PCR、IHC检测大鼠肝组织中脂肪酸合成酶(FASN)的nRNA和蛋白表达。体外实验:采用油酸/棕榈酸(OA/PA)共同刺激人肝癌细胞株HepG2,制备NAFLD体外细胞模型并用不同浓度ACF进行干预。油红O染色观察胞浆内脂质沉积情况;酶偶联比色法检测胞内TC、TG的含量;Real time-PCR检测miR-122的表达;Real time-PCR、Western Blot检测FASN的mRNA和蛋白表达。结果:体内实验:(1)与对照组相比,模型组大鼠的肝指数有明显增加,具有统计学差异(P<0.05),复方蛋氨酸胆碱组和ACF各剂量组的肝指数与模型组相比均有明显降低,且有统计学意义(P<0.05);(2)HE染色结果显示,对照组中肝组织以中央静脉为中心向四周呈放射状排列且吻合成网,肝细胞围绕中央静脉成索条状排列。模型组大鼠的肝组织有明显的脂肪性炎性改变(以肝细胞中大量脂肪空泡,伴有炎细胞浸润为主),提示造模成功。复方蛋氨酸胆碱组及ACF各剂量组的脂肪性炎性改变与模型组相比较有明显减轻和好转;(3)生化比色法检测结果显示,与对照组相比,模型组中血清ALT、AST, TG、TC、LDL-C的含量显著增加,HDL-C含量明显下降,均具有统计学意义(P<0.05);胆碱组和不同剂量ACF干预后,血清ALT、AST、TG、TC、LDL-C的含量较模型组相比明显降低(P<0.05),但HDL-C含量无明显差异(P>0.05);(4)与对照组相比,模型组大鼠miR-122表达明显降低,FASN的mRNA和蛋白表达显著升高,具有统计学差异(P<0.05);胆碱组和不同剂量ACF干预后,各组大鼠肝组织miR-122表达较模型组显著升高、FASN的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.05)。体外实验:(1)油红O染色结果显示,对照组HepG2细胞核仁清楚,呈蓝色,细胞浆内有少量着色颗粒样物质。模型组中胞核居中,胞浆内有大量被染成桔红色或红色的颗粒状脂滴,分布在靠近细胞膜的区域,提示造模成功。不同浓度ACF干预后,胞浆内红色颗粒状脂滴有不同程度减少;(2)胞内TC、TG含量检测显示模型组中TG、TC浓度比对照组明显增高(P<0.05),不同浓度ACF干预后TG、TC浓度较模型组明显降低(P<0.05);(3)Real time-PCR和Western Blot结果显示模型组中miR-122的表达明显降低,FASN的mRNA和蛋白表达显著升高,与对照组相比具有统计学差异(P<0.05);ACF干预后miR-122的表达明显增加,而FASN的mRNA和蛋白表达降低明显,与模型组相比较均有显著差异性(P<0.05)。结论:(1)复方茵陈脂肝颗粒能明显改善NAFLD模型大鼠的肝脏脂肪变性和抑制HepG2模型细胞脂滴聚集,提示复方茵陈脂肝颗粒对NAFLD具有明显的疗效;(2)体内外实验证实复方茵陈脂肝颗粒能上调miR-122和下调FASN在NAFLD动物和细胞模型中的表达水平,提示通过调控miR-122和FASN的表达可能是复方茵陈脂肝颗粒治疗NAFLD的作用机制之一