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1目的白及为兰科植物白及Bletilla striata (Thunb.) Reichb. f.的干燥块茎,有收敛止血,消肿生肌的功效。中药配方颗粒是用符合炮制规范的中药饮片为原料,经现代工业提取、浓缩、干燥、制粒、精制而成的纯中药系列产品,其在临床应用上克服了传统饮片煎煮、服用不方便等问题,具有巨大的优势和市场前景。为了更好的控制白及配方颗粒的质量,本研究依据白及药材的性质和特点,利用现代提取技术和工艺,对白及饮片、配方颗粒制备工艺以及质量标准进行较系统的研究,为白及配方颗粒的临床大规模推广和使用打下基础。2方法2.1 白及饮片质量标准研究参照《中国药典》2010年版,对白及中药饮片进行水分、灰分常规检查,及薄层鉴别。另外采用冷浸法测定其水溶性浸出物含量,通过HPLC法测定白及化学成分肉桂酸含量。因为多糖为白及的主要成分,因此以多糖得率为评价指标,比较不同提取方法对白及水溶性多糖得率的影响。通过单因素试验和正交试验,优化提取方法。在对粗多糖的纯化过程中,分别对脱蛋白及醇沉工艺进行考察。建立白及多糖薄层鉴别方法及含量测定方法。并以DPPH自由基和羟基自由基为对象,考察白及粗多糖的抗氧化性,并初步考察白及水提液及白及多糖的抑菌活性。采用HPLC法对白及饮片进行分析,对提取条件(包括提取溶剂、静止时间、提取次数、超声功率等)和色谱条件(包括流动相梯度、检测波长等)进行优化和系统的方法学考察,建立白及饮片的指纹图谱。2.2配方颗粒提取工艺控制以标准煎剂为基础,对白及的提取工艺和浓缩工艺进行考察,确定其提取及浓缩的工艺参数,并以干膏率、薄层鉴别、指纹图谱、肉桂酸含量为指标对白及优化工艺水提液质量控制进行研究。2.3配方颗粒质量标准研究通过对不同厂家的配方颗粒的薄层鉴别、指纹图谱、肉桂酸含量进行考察,与本研究中的药材饮片及水提液进行比较研究,以期建立质量稳定可控的配方颗粒质量标准。3结果3.1 白及饮片质量标准研究本研究13批白及药材水分、灰分检查项及薄层鉴定均符合药典要求,暂定白及饮片水溶性浸出物(冷浸法)含量不得少于30.0%；采用微波辅助提取白及多糖,提取的最佳条件为：按料液比1:75(W/V, g:mL),以提取温度50℃,提取时间为15 min,微波功率700 W,提取2次。在此微波辅助提取条件下,白及多糖的提取率为25.80%,优于超声波提取率(13.52%)及回流提取率(14.14%)。各因素对白及多糖影响的主次顺序为：提取次数>料液比>提取时间>提取温度；通过白及多糖的薄层鉴别方法学考察,在温度15℃,湿度32%的条件下,样品中葡萄糖和甘露糖分离度高,斑点清晰；建立了肉桂酸及多糖含量的HPLC方法,暂定本品按干燥品计算,含肉桂酸的总量不得少于0.020%,葡萄糖及甘露糖含量分别应不少于0.50%和0.70%；建立了白及饮片指纹图谱共有模式,标定了13个共有指纹峰,各批次样品平均相似度大于0.902；白及粗多糖对DPPH自由基和羟基自由基也具有一定清除作用；白及的超声提取液具有明显的抑菌活性。3.2配方颗粒提取工艺控制确定白及配方颗粒提取及浓缩工艺为：取白及饮片,分别加10、8、8倍量的水煎煮三次,每次煎煮1.5小时,300目滤布趁热过滤,合并三次滤液,于真空度-0.06--0.09条件下,80℃下减压浓缩,即得。水提液质量标准研究表明,十三批白及的出膏率范围为10.19%-40.25%之间；肉桂酸含量范围为0.0011%-0.0182%之间；标定了10个共有指纹峰,各批次样品平均相似度大于0.866,不同产地的白及水提液指纹图谱共有峰相似性较好。3.3配方颗粒质量标准研究建立了白及配方颗粒的薄层鉴别、指纹图谱、肉桂酸含量测定的方法,并对10批白及配方颗粒薄层鉴别研究发现,个别批次白及配方颗粒的斑点不清晰或难以发现。不同批次配方颗粒肉桂酸含量差异明显。指纹图谱研究显示,不同批次配方颗粒间相似度较低,分别将各批配方颗粒与饮片及水提液的共有模式比较,F1批次与饮片相似度最大,而A1、A2、A3、A4批次与饮片相似度较低,小于0.1。4结论4.1 白及饮片质量标准研究13批白及饮片水分、灰分、薄层鉴别均符合药典要求；白及多糖的微波辅助方法与传统的回流浸提法相比,具有节能高效的优点,利用白及多糖提取工艺优化所得多糖,建立了白及多糖薄层鉴别及含量测定方法,方法简便、快速,适用于白及饮片多糖的薄层鉴别及含量测定,可以作为白及饮片的质量控制标准；建立了白及饮片中肉桂酸含量测定的方法及白及指纹图谱测定方法对其质量进行控制；白及的超声提取液具有明显的抑菌活性；多糖具有一定的抗氧化活性。4.2配方颗粒提取工艺控制优化工艺接近于标煎各项指标,重复性好,表明该优化工艺可用于白及配方颗粒的生产；水提液的质量控制各项指标研究为其配方颗粒质量控制提供依据。4.3配方颗粒质量标准研究建立的白及配方颗粒的薄层鉴别、指纹图谱、肉桂酸含量测定的方法操作简便、重现性好,为白及配方颗粒的质量评价打下基础。