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本研究主要进行了两个相互独立的工作：1微生物絮凝剂HBF-3的剂型研究絮凝剂HBF-3是由一株深海盐单胞菌V3a’(Halomonas sp. V3a’)产生的一种酸性多糖,具有较好的絮凝活性。为进一步开发利用该生物絮凝剂,本实验进行了剂型研究。以5%蔗糖为保护剂,采用冷冻干燥技术将发酵液制成固体剂型,冻干的HBF-3能够迅速复溶于水,絮凝活性为82.4%,维持了较高的絮凝活性。采用旋转蒸发浓缩,浓缩液稀释后的絮凝活性与初始发酵液相比,变化不大。对液体浓缩型絮凝剂添加1.0g/L山梨酸钾,样品在4℃、28℃、37℃、50℃储存一个月后能够保持90%以上的絮凝活性。2 vip3Aa基因对淡紫拟青霉的遗传转化淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)作为根结线虫(Meloidogyne spp.)、胞囊线虫(Heterodera spp.)等植物病原线虫的有效寄生菌,被认为是最有前途的植物病原线虫的生防真菌之一。Vip3Aa是苏云金芽胞杆菌在营养期开始表达的可溶性蛋白,对甜菜夜蛾和小地老虎具有很高毒力。本研究首次将vip3Aa基因转化到淡紫拟青霉基因组中,以获得既能防治根结线虫又能防治小地老虎等地下害虫的工程菌株。将vip3Aa基因克隆到pET28b(+)载体,并在大肠杆菌中表达,经纯化后得到Vip3Aa蛋白,以此作抗原免疫新西兰兔制备抗Vip3Aa多克隆抗体。分别以pcDNA3.1(-)和pcDNA3.1(+)为中间质粒,构建了vip3Aa基因的遗传转化载体puPVNT并将该质粒转化根癌农杆菌LB4404。以G418抗性基因为筛选标记,采用ATMT(Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation)法实现了vip3Aa基因对淡紫拟青霉9410菌株的遗传转化。PCR检测证实,vip3Aa基因成功整合到淡紫拟青霉9410菌株的基因组中。