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目的 提供高质量的重组膜抗原是提高HIV ELISA检测试剂质量、提高gp41抗体检测特异性和灵敏性的的最重要的环节。本课题构建了HIV-1 SF2株跨膜蛋白gp41第二优势表位簇基因的原核高效表达克隆，初步检验该融合蛋白抗原性，探讨将其作为侯选多肽用于制备诊断试剂、检测HIV-1抗体的可能性；并探讨提高原核表达的途径。 方法利用密码子的兼并性，在保证目的基因编码氨基酸不变和不改变引物特异性的前提下，在PCR上游引物引入突变碱基。然后，通过聚合酶链式反应扩增HIV-1SF2毒株跨膜蛋白gp41基因片段(nt 9153-9233)。该基因编码相当于即160的第649-675位氨基酸残基，即gp41的第二优势表位簇。PCR产物和融合蛋白表达载体pGEX-4T-2经EcoRI和SalI双酶切后连接，得到重组质粒pGEX-4T-2／SE，并转化表达宿主菌DH5α。获得含重组质粒的宿主菌，经IPTG诱导，高效表达出HIV-1第二优势表位簇融合蛋白，产物经SDS-PAGE，使用凝胶成像系统扫描目的融合蛋白的含量百分比，并进行Western-Blot检测其与HIV-1阳性血清及正常人血清的反应。 结果 获得了表达HIV-1gp41第二优势表位-GST融合蛋白的重组菌DH5α，经IPTG诱导，融合蛋白得到高效表达。凝胶成像系统扫描SDS-PAGE电泳结果表明，融合蛋白表达量占总菌体蛋白的30％；Western-Blot表明，该重组蛋白可与来自HIV-1感染者的 中文摘要血清发生特异性反应，而与阴性血清不发生反应。 结论 在原核表达体系中高效表达HIV刁 第二优势表位簇，该重组蛋白具有良好的抗原性，可以作为HIV－IELISA筛查试剂的侯选抗原；并对提高外源基因在大肠杆菌中的表达水平进行了有益的探索。