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脂肪酶用于化学品合成具有反应条件温和、催化效率高、反应特异性高、环境污染小等优点。酶固定于载体后可以克服游离酶存在的一些缺点，如较低的稳定性、产物与副产物难分离和无法循环使用等。本文以褶皱假丝酵母脂肪酶为研究对象开展固定化研究，并将其用于生物柴油制备和α-蒎烯的环氧化体系。 首先，选用三类载体（羧基碳纳米管、磁性微球和膨润土）固定化脂肪酶Lipase OF。碳纳米管固定化酶的活性和储藏稳定性随碳纳米管的种类而不同，以多壁碳纳米管(MCNTs-COOH)固定化效果最佳，储藏12天能保持79.8％的活力。经壳聚糖或二氧化硅改性之后的磁性微球固定化酶活性和稳定性均优于未改性的。以两种改性膨润土——钠基膨润土(Na-bentonite)和碱性钙基膨润土（Ca-bentonite）为载体，分别采用吸附或共价法制备固定化酶，Ca-bentonite lipase的固载量和比活力较Na-bentonite lipase高。 考虑到膨润土价廉易得，因此进一步探索其作为载体的可能性。采用氨基酸作为“柔性链”对Ca-bentonite改性获得氨基酸膨润土，然后共价法制备固定化酶。考察8种氨基酸改性对固定化酶催化性能的影响，发现链长是影响酶活及重复使用性的关键因素，以中等链长的谷氨酸改性最好，固定化酶比活为62.1U·mg-1protein，稳定性大幅提高，在橄榄油水解反应体系中重复使用6次后可保持68％的活力。XRD及FT-IR结果显示酶成功固载于膨润土表面;固定化后酶的Km和Vmax值分别由1.88mg·ml-1和17.31μg·min-1提高至6.74mg·ml-1和48.78μg·min-1，说明酶与底物的亲和力降低，但是酶被激活，催化效率提高。采用合适的表面活性剂处理固定化酶可进一步提高酶活，最佳处理时间为1h，曲拉通X-100和X-114可提高酶活约2倍。 以谷氨酸改性膨润土(Glu-Bent)为载体，制备出不同来源的商业褶皱假丝酵母脂肪酶的固定化酶——Glu-Bent-lipase OF和Glu-Bent-CALB。前者用于生物柴油体系，转化率从52.8％提高至99.9％，重复使用十次转化率可保持为53.8％，游离酶重复使用两次就已失活。Glu-Bent-CALB应用于α-蒎烯环氧化反应，α-蒎烯转化率可达70.7％，且可以在体系中重复使用。