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目的：建立大鼠带血管膝关节移植模型，研究不同组膝关节移植后，大鼠外周血单个核细胞(PBMC)中 CD45相关细胞的变化规律，探讨可用于早期诊断骨关节移植后移植排斥反应的指标，并通过观察不同实验组术后免疫排斥反应情况，验证深低温二步冷冻法可否降低移植物的抗原性，减弱移植排斥反应。 方法：利用显微外科技术，建立SD/Wistar大鼠带血管膝关节移植模型，A组：带血管自体膝关节移植，B组：新鲜带血管同种异体膝关节移植，C组：冷冻保存带血管同种异体膝关节移植。术后均不使用免疫抑制剂，于术前及术后1天、3天、5天、7天、9天各采血500ul，利用流式细胞仪(FCM)，检测外周血单个核细胞中CD4+CD45RC+、CD4+细胞百分比的变化。观察各组动物术后排斥反应，并于术后第3天、第6天和第9天切取移植动脉做苏木精-伊红(HE)染色，行病理组织学检查。 结果：1、各组大鼠术前和术后第1天所测得外周血单个核细胞中CD4+CD45RC+、CD4+细胞百分比无明显变化(P>0.05)，三组间无显著性差异(P>0.05)。2、A组大鼠术后第3天和第5天测得外周血单个核细胞中CD4+CD45RC+细胞百分比较手术前下降(P<0.05)，随后出现回升趋势，术后第9天恢复至手术前水平。B组大鼠在术后第3天外周血单个核细胞中CD4+CD45RC+细胞百分比明显升高，与A组和 C组测得结果相比差别有显著性(P<0.001)，术后第5天有轻度下降，但仍高于 A组和C组所测结果(P<0.05)。C组冷冻保存异体移植组外周血单个核细胞中CD4+CD45RC+细胞百分比仅在术后第3天略有升高，之后恢复至术前水平，与A相比较无显著差异性(P>0.05)。A组和C组大鼠外周血单个核细胞中CD4+细胞百分比至术后第5天恢复至术前水平(P>0.05)，B组新鲜异体移植组大鼠在术后第3天开始明显升高，并有上升趋势，与A组和C组测得结果相比差别有显著性(P<0.01)。3、A组和 C两组移植动脉内皮细胞未见明显脱落，内皮细胞间隙无明显增宽，仅有少许炎性细胞浸润，血管壁增厚，但血管保持通畅，B组移植血管内皮细胞术后第3天开始脱落，中层弹力纤维暴露，术后第6天血管全层大量炎性细胞浸润，术后第9天管腔完全栓塞，出现肉芽组织及血管再通现象。结论：1、二步深低温冷冻技术能降低带血管同种异体关节的免疫原性，宿主产生免疫耐受，免疫排斥反应减轻，有助于吻合血管通畅，移植物的成活。2、新鲜带血管同种异体骨移植后外周血单个核细胞中 CD4+CD45RC+细胞百分比较术前、自体移植组和冷冻保存移植组均有显著变化，CD45可作为早期移植排斥反应的预防诊断指标。