新疆褐牛四种脂代谢调控基因的表达及其与脂肪组织生物学的相关性研究

来源 :新疆农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:suojianpku798
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新疆褐牛的遗传背景复杂,与肉品质成因密切相关的体脂代谢生理生化以及分子生物学机制知之甚少,本论文拟对新疆褐牛脂代谢调控基因的组织特异性表达及其与脂肪生物学的相关性进行研究,以期为阐明新疆褐牛体脂代谢调控机制奠定基础。本论文采用以下研究方法1、选取成年、健康新疆褐牛公牛20头,禁食12h后屠宰,分别采取皮下脂、肾周、心周和肌间的脂肪样品,采用荧光定量PCR方法对不同部位脂肪组织中瘦素基因(lep)、脂肪酸合成酶基因(fas)、脂蛋白酯酶基因(lpl)、肥胖相关基因(fto)的表达进行测定。2、采用冰冻切片技术制备肌间脂肪、皮下脂肪、肾周脂肪和心周脂肪组织切片,通过Motic显微图像处理系统计算脂肪细胞面积和单位面积内脂肪细胞数量,并与四种脂代谢调控基因的表达量之间进行相关分析。3、采用酶联免疫(ELISA)和放免(RIA)方法对血液中11种脂代谢相关酶、10种脂代谢相关激素进行测定,并与四种脂代谢调控基因的表达量之间进行相关分析。通过试验得到以下结果:新疆褐牛4个部位脂肪组织,除fas基因表达差异不显著;lep、lpl基因在肌间、心周脂肪中表达较强,fto在心周脂肪中表达最强。同一部位脂肪组织中各基因表达存在差异:在肌间lep基因表达量显著高于其他基因,在皮下fas基因表达量显著高于其他基因(P<0.05),肾周中lpl、fto基因的表达显著(P<0.05),心周中fto基因表达量显著高于其他基因。脂肪细胞面积及数量有部位特异性,各部位脂肪细胞面积顺序:肾周>皮下、心周和肌间。单位面积细胞数量顺序:肌间和皮下>心周和肾周。除fas、fto基因外,肌间脂肪细胞面积与其lep基因表达量(r=-0.3656;P<0.05)呈显著负相关、与lpl(r=-0.51;P=0.0581)表达量有相关趋势;心周脂肪细胞面积与其lep、lpl基因表达(r=-0.4133,r=-0.47; P<0.05)呈显著负相关;肾周脂肪细胞面积与其4种基因表达都无显著相关(P>0.05)。四种脂代谢调控基因在各部位脂肪中表达量与其细胞数量无显著相关(P>0.05)。肌间、心周脂肪中lep的表达与血中LPL(r=0.88P<0.01和0.92,P<0.05)及FAS(r=0.87和0.90,P<0.01)呈强正相关;肾周脂肪中lep表达与LPL和FAS浓度呈中等强度正相关(r=0.52和0.50;P<0.05)。肌间、皮下脂肪中lpl表达与血中FAS(r=0.80和0.61;P<0.05)和LPL(r=0.82,P<0.01;r=0.63,P<0.05)呈强正相关。肌间、心周、肾周脂肪中lep表达与血中LEP含量呈强正相关(r=0.87和0.92,P<0.01;r=0.52,P<0.05),肌间、皮下脂肪中lpl表达与血中LEP(r=0.82,r=0.62;P<0.01)呈强正相关。肌间脂肪中fto表达与血中LEP呈中等强度负相关(r=-0.78,P<0.05)。通过结果分析得到以下结论:新疆褐牛四种脂代谢调控基因的表达具有组织特异性。新疆褐牛脂肪细胞面积、数量在不同部位有其特异性,该结果提示可能与前脂肪细胞个数、分化、血液供应和激素调节有关。四种脂代谢调控基因表达与其细胞形态学有相关性。提示在发育后期,脂肪沉积主要是细胞中脂肪滴充盈,而细胞未有明显的增殖。对四种脂代谢调控基因表达与11种和10种脂肪代谢相关酶、激素进行相关分析,表明脂肪组织中lep、fas、lpl的表达可能调节血中LPL、LEP浓度;在体脂代谢基因调控过程中,影响血中LEP、FAS、LPL、FTO的代谢。该研究为新疆褐牛脂代谢调控机理研究提供了生理生化与分子生物学依据,为其肉品质选育分子标记、探索其脂代谢调控机理奠定了基础。
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