论文部分内容阅读
为了明确番荔枝种子提取的杀虫活性和对SL细胞毒理研究,采用浸叶法、MTT法和流式细胞术等方法,研究了番荔枝(Annona squamosa)种子提取物及其化合物的杀虫活性和番荔枝内酯化合物对斜纹夜蛾(Spodoptera litura)卵巢细胞(SL细胞)的细胞毒力和致细胞凋亡作用。
研究结果表明,番荔枝种子提取物及其化合物均对小菜蛾(Plutella xylostella)3龄幼虫具有良好的毒杀活性,处理24h后,番荔枝种子提取物、化合物布拉它辛(bullatacin)和squamocin对小菜蛾3龄幼虫的LC50值分别为257.78μg/mL、93.06μg/mL和194.50μg/mL。处理48h后,番荔枝种子提取物、布拉它辛和squamoein对小菜蛾3龄幼虫的LC5o值分别为186.64μg/mL、52.51μg/mL和121.16μg/mL。
番荔枝种子提取物和化合物均对亚洲玉米螟幼虫(Ostrinia fumacalis)具有良好的毒杀活性,处理24h后,番荔枝种子提取物、化合物布拉它辛和squamocin对亚洲玉米螟3龄幼虫的LC5o值分别为220.83μg/mL、98.63μg/mL和124.51μg/mL。处理48h后,番荔枝种子提取物、布拉它辛和squamocin对亚洲玉米螟3龄幼虫的LC50值分别为168.51μg/mL、67.77μg/mL和84.54μg/mL。
番荔枝种子提取物及其化合物均对致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)4龄幼虫具有良好的毒杀活性,处理24h后,番荔枝种子提取物、化合物布拉它辛和squamocin对致倦库蚊4龄幼虫的LC50值分别为0.31μg/mL、0.06μg/mL和0.22μg/mL。处理48h后,番荔枝种子提取物、布拉它辛和squamocin对致倦库蚊4龄幼虫的LC50值分别为0.13μg/mL、0.03μg/ml和0.14μg/mL。
番荔枝种子提取物和化合物均对白纹伊蚊(Aedes palbopictus)3龄幼虫具有良好的毒杀活性,处理24h后,番荔枝种子提取物、化合物布拉它辛和squamocin对白纹伊蚊3龄幼虫的LC50值分别为2.67μg/mL、0.40μg/mL和0.82μg/mL。处理48h后,番荔枝种子提取物、布拉它辛和squamocin对白纹伊蚊3龄幼虫的LC50值分别为1.55μg/mL、0.32μg/mL和0.64μg/mL。
布拉它辛和squamocin对斜纹夜蛾幼虫具有明显的生长发育抑制作用,100μg/mL和200μg/mL布拉它辛处理斜纹夜蛾3龄幼虫后5d,布拉它辛对试虫体重增长抑制率分别为30.84%和53.17%,100μg/mL和200μg/mL squamocin处理斜纹夜蛾3龄幼虫5d后,squamocin对试虫体重增长抑制率分别为37.23%和61.62%。
通过对番荔枝内酯化合物的细胞毒力研究表明,番荔枝内酯化合物布拉它辛和squamocin对SL细胞有较好的增殖抑制作用。处理24h后,对SL细胞的IC50值分别为21.52μg/mL和22.32μg/mL,处理48 h后,对SL细胞的IC50值分别为4.80μg/mL和10.03μg/mL。
5μg/mL布拉它辛处理SL细胞24h和48h后,胞内MIF平均值分别为46.29和30.61,10μg/mL布拉它辛处理布拉它辛处理SL细胞24h和48h后,胞内MIF平均值分别为34.54和24.76。5μg/mL squamocin处理SL细胞24h和48h后,胞内MIF平均值分别为39.35合32.28,10μg/ml布拉它辛处理squamocin处理SL细胞24h和48h后,胞内MIF平均值分别为32.02和18.86,从各个处理浓度可以看出番荔枝内酯化合物对SL细胞线粒体膜电位的下降是一个渐进的过程。
通过流式细胞仪测定番荔枝内酯化合物一开始引起SL细胞前期凋亡,随着药物的作用时间的增加,细胞开始进入细胞凋亡晚期,最终引起细胞坏死或死亡。
本研究表明番荔枝内酯具有良好的杀虫活性,并且其化合物能明显抑制SL细胞的增殖,诱导细胞凋亡,降低线粒体膜电位,番荔枝内酯的毒理研究对于研制新农药具有重要的参考价值。