扩展莫尼茨绦虫三个差异基因在不同节片间的表达规律及序列分析

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扩展莫尼茨绦虫属于扁形动物门绦虫纲,多节绦虫亚纲,圆叶目,裸头科莫尼茨属,扩展莫尼茨绦虫和贝氏莫尼茨绦虫为常见优势种,其广泛分布于国内外养羊区。扩展莫尼茨绦虫其内部器官从发育、成熟到凋亡呈现出一系列的变化规律。由于绦虫每个节片又都可以看作是一个个体,因此,可以将节片间的比较视作一个个体不同后代间的比较,而且这些后代间的个体间遗传差异很小,对于其基因功能的研究十分有利,具有其它模式生物无法比拟的优势。本文对扩展莫尼茨绦虫三个差异基因全序列进行了分析。主要研究内容如下: ⑴bZIP是一类碱性亮氨酸拉链类型的转录因子。为了研究扩展莫尼茨绦虫bZIP基因在其头节、幼节、成节、孕节生长过程中的表达规律,我们从扩展莫尼茨绦虫cDNA文库克隆得到了扩展莫尼茨绦虫bZIP的cDNA序列,该基因全长1898bp,包含一个ORF,编码574个氨基酸,属于bZIP蛋白家族,与果蝇同源性达53%,命名为kzbZIP,推测蛋白的理论分子量为62.78KDa,等电点为8.76。Real Time PCR结果表明kzbZIP在头节呈低丰度表达,在幼节也呈低表达,在成节表达量最低,在孕节则呈高表达。这表明kzbZIP作为转录因子,推测其在孕节组织中对某类生成虫卵的基因的表达调控起着非常重要的作用。 ⑵RAD51是一种DNA修复蛋白。我们通过cDNA文库克隆得到了扩展莫尼茨绦RAD51的cDNA序列,该基因全长1615bp,包含一个ORF,编码304个氨基酸,推测蛋白的理论分子量为33KDa,等电点为4.51,属于RAD51蛋白家族,与蝾螈氨基酸同源性达85.56%,命名为kzRAD51。Real Time PCR结果表明kzRAD51在头节呈高丰度表达,幼节也呈高表达,在成节表达量最低,在孕节则呈低表达。这表明kzRAD51作为DNA修复基因,推测其对成节和孕节发育相关的某类基因的损伤修复起着重要的作用。 ⑶PKC是一种信号分子,广泛参与细胞的信息传递和肿瘤细胞的生长、分化、增殖等过程。为了研究扩展莫尼茨绦虫PKC在其头节、幼节、成节、孕节生长过程中的表达规律,我们从cDNA文库中克隆得到了扩展莫尼茨绦虫PKC的cDNA序列,该基因全长1356bp,包含一个ORF,编码379个氨基酸,推测蛋白的理论分子量为40KDa,等电点为9.19,属于PKC蛋白家族,与水熄虫氨基酸同源性达57.1%,命名为kzPKC。RealTime PCR结果表明kzPKC在头节呈低表达,幼节呈高表达,在成节和孕节上均呈是低表达。这表明kzPKC做为一种信号分子,可能影响着成节和孕节组织的生长发育过程。
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