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目的:食管癌是常见的消化道恶性肿瘤,按照组织学可分为五种,我国以食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）最为常见,约占90%,食管腺癌（esophageal adenocarcinoma,EA）次之,其他类型均少见。目前针对ESCC的治疗措施仍以手术为主,但由于其早期症状不明显,且缺乏有效的诊断方法,大多数病人确诊ESCC时已属中晚期,5年生存率不足20%。因此,对患者进行早诊断、早治疗以及寻找治疗ESCC有效的分子生物学标记意义重大。大量临床研究和实验证明,表观遗传学在癌症的发生发展中扮演着重要的作用,DNA甲基化是表观遗传学的重要机制之一,因此去甲基化药物在抗肿瘤方面的作用也成为了研究的热点。随着对去甲基化药物研究的深入,非甾体类抗炎药（nonsteroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs）诸如阿司匹林、塞来昔布均被发现具有去甲基化的作用。这一作用在胃癌,结肠癌及直肠癌均已被证实,但是针对NSAIDs对ESCC甲基化影响的研究仍较少。本研究将观察ESCC组织及配对正常组织中P16ink4a基因启动子区甲基化状态,深入分析该状态与食管鳞癌患者临床病理关系。同时观察塞来昔布对食管癌细胞系Eca109中P16ink4a基因启动子区甲基化状态、m RNA表达及增殖能力的影响。方法:1组织:选取河北医科大学第四医院胸三科2016年3月2016年10月间食管鳞癌患者,共50例。患者术前、术后均经病理证实为ESCC,均未给予任何放、化疗,均未长期服用阿司匹林等NASIDs。利用甲基化特异性聚合酶链反应（methylation-specific polymerase,MSP）对癌组织及配对正常组织中P16ink4a基因启动子区进行甲基化检测,计算甲基化率。2细胞:正常培养食管鳞状细胞癌细胞系Eca109,实验组塞来昔布培养48小时,对照组给予等浓度的二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide,DMSO）。利用MSP对细胞中P16ink4a基因启动子区甲基化状态进行检测,利用逆转录实时定量聚合酶链反应（quantitative real-time reverse transcription-polymerase chain reaction,q RT-PCR）检测该基因m RNA表达情况,利用CCK-8检测塞来昔布在食管癌细胞系Eca109增殖中发挥的作用。利用SPSS21.0软件对实验数据进行统计分析。甲基化状态与临床病理学参数关系应用卡方检验;食管鳞状细胞癌细胞系Eca109中基因m RNA表达分析应用秩和检验;食管鳞癌细胞系Eca109增殖能力的比较应用t检验或校正t检验。P<0.05为差异具有统计学意义。结果:1 P16ink4a基因启动子区甲基化状态及其与临床病理学参数的关系。MSP显示P16ink4a基因启动子区在食管鳞状细胞癌组织中的甲基化率为48%（24/50）,正常组织中的甲基化率为12%（6/50）,差异具有统计学意义（P<0.05）。P16ink4a基因启动子区甲基化状态与患者的性别及吸烟史无关（P>0.05）,与饮酒史、淋巴结转移、脉管瘤栓、神经受侵及TNM分期有关（P<0.05）。2塞来昔布对食管鳞癌细胞系Eca109中P16ink4a基因启动子区甲基化状态的影响。MSP显示实验组塞来昔布处理食管癌细胞系Eca109后,其甲基化程度逐渐降低,非甲基化程度逐渐升高。对照组DMSO处理后甲基化程度变化不明显。3塞来昔布对食管癌细胞系Eca109中P16ink4a基因m RNA表达的影响。q RT-PCR显示实验组塞来昔布处理食管癌细胞系Eca109后,浓度为40μmol/L、60μmol/L、80μmol/L和100μmol/L时,m RNA表达量明显高于未用药组m RNA表达量,差异具有统计学意义（P=0.037;P=0.014;P=0.002;P=0.043）。对照组DMSO处理后,各用药浓度组m RNA表达量与未用药组相比无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）。4塞来昔布对食管鳞癌细胞系Eca109增殖能力的影响CCK-8显示实验组处理食管癌细胞系Eca109后,在24h、48h、72h细胞增值率较未用药组降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。对照组处理食管癌细胞系Eca109后,在24h、48h、72h细胞增值率较未用药组无改变,差异无统计学意义（P>0.05）。结论:1 P16ink4a基因启动子区甲基化状态与患者性别及吸烟史无关,与饮酒史、淋巴结转移、脉管瘤栓、神经受侵及TNM分期有关。2塞来昔布可以降低P16ink4a基因启动子区甲基化程度。3塞来昔布可提高P16ink4a基因在食管癌细胞系Eca109中的表达。4塞来昔布可抑制食管癌细胞系Eca109增殖。