胰腺癌吉西他滨耐药相关分子的筛选及功能研究

来源 :中国人民解放军医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wenlingqiang6268047
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
胰腺癌是恶性程度最高的消化道肿瘤之一,发病率和死亡率较高。胰腺癌早期诊断困难、治疗手段有限、预后极差。造成不良预后的一个主要原因是胰腺癌对化疗药物的耐药性。目前以吉西他滨为基础的化疗方案是胰腺癌术后辅助治疗、新辅助治疗和晚期化疗的一线方案,但只有少部分病人能从化疗中获益,胰腺癌对吉西他滨的原发和获得性耐药是影响疗效的主要原因。因此,对胰腺癌吉西他滨耐药的机制进行深入研究有助于我们发现新的治疗靶标,从而提高化疗效果,改善病人预后。吉西他滨发挥功能的主要机制是促进癌细胞的凋亡,而癌细胞凋亡信号途径的失调是导致吉西他滨耐药的重要原因之一。Bcl-XL是胰腺癌中主要的抗凋亡蛋白,但具体调控机制仍不明确。GATA结合蛋白1(GATA1)是最早发现的GATA转录因子家族成员,在胰腺癌中的功能尚未有报道。我们发现,GATA1在胰腺癌组织中的表达明显高于癌旁组织。高表达GATA1的胰腺癌病人总生存期(OS)和无复发生存期(RF S)较短。GATA 1表达水平可以预测吉西他滨治疗病人的预后,在接受吉西他滨治疗的病人中,高表达GATA1的病人OS和RFS较短,而在未接受西他滨治疗的病人中,GATA1的表达不影响病人的OS和RFS。细胞生长曲线和克隆形成实验表明,GATA1促进胰腺癌细胞增殖;细胞存活曲线和建立的耐药细胞系等实验证明,GATA1促进胰腺癌细胞的原发和获得性耐药。双荧光素酶报告基因和染色质免疫共沉淀实验表明,GATA1通过结合在Bcl-XL的启动子上并促进其转录。流式细胞和裸鼠成瘤等实验发现,GATA1在体外和动物体内通过调控Bcl-XL激活抗凋亡通路,诱导胰腺癌细胞吉西他滨耐药。在Bcl-XL敲低的胰腺癌细胞中,GATA1丧失了促进胰腺癌细胞耐药的功能,因此,GATA1以Bcl-XL依赖的方式调节吉西他滨耐药。在胰腺癌临床标本中,Bcl-XL与GATA1的表达水平呈正相关。生存分析显示,在接受吉西他滨治疗的病人中,Bcl-XL的表达与胰腺癌病人OS和RFS相关。Cox回归分析结果表明,GATA1和Bcl-XL都是胰腺癌的独立预后指标。近期研究发现microRNA通过不同通路调节胰腺癌吉西他滨耐药,但其功能和机制尚未完全阐明。决定吉西他滨治疗效果的另一个重要环节是药物的摄取,吉西他滨进入细胞主要通过人平衡核苷转运体(hENT1)进行转运摄取。目前关于调控hENT1表达水平机制的研究非常少,miRNA对肿瘤细胞中的hENT1表达水平是否起重要调控作用尚不明确。我们通过对吉西他滨耐药细胞株miRNA表达谱测序分析,发现miR-1197表达水平上调。通过细胞存活曲线、克隆形成等实验,我们发现miR-1197在胰腺癌细胞原发和获得性耐药中起重要作用。双荧光素酶报告基因实验证明miR-1197结合在hENT1信使RNA的3’端非翻译区调控其表达。通过Westem blot、流式细胞术和裸鼠皮下成瘤等实验,我们发现,miR-1197在体外和动物体内,通过下调hENT1表达诱导胰腺癌吉西他滨耐药。在胰腺癌临床标本中,miR-1197与hENT1表达呈负相关,生存分析显示miR-1197与接受吉西他滨化疗的胰腺癌病人预后相关。综上所述,我们发现了调控胰腺癌吉西他滨耐药的新的转录因子GATA1和新的microRNA miR-1197,这两种分子分别以抗凋亡和药物转运两种不同的机制,影响胰腺癌对吉西他滨的敏感性,并且在预测临床病人化疗效果和预后方面有显著意义,为胰腺癌吉西他滨耐药机制提供了新的证据,为克服胰腺癌耐药提供了新的思路和潜在靶点。
其他文献
当前高三习题课存在这样的情况:部分数学教师更加注重的依然在于学生做题的数量,而不在于讲解的质量。
医疗保障问题是政府部门非常关心的重大民生问题,医疗保障利益也是我们每个人都深切关注的重要现实利益。解决好我国经济社会转型期的居民的医疗保障问题,将对我国的经济建设
<正>目的:对比研究三种玻璃离子水门汀对牙釉质和牙本质的粘接强度。材料与方法:分别制作60个直径16 mm,厚4 mm的牙釉质及牙本质标准试件,每个试件依次用200#、400#、600#水
会议
近来,自然灾害、意外伤害、疾病突发等事故时有发生,严重威胁人民生命安全,引发社会高度关注。在意外事故灾害突发,专业救援人员赶到以前,如何在“黄金时间”进行有效的自救
伴随着人类文明的进步,大规模的工业文明和社会文明发展也让能源问题变得越来越突出。未来哪个国家能占领能源技术制高点,那就一定能在世界话语权争夺中占据有利地位。这其中
伴着改革开放的步伐,我国房地产业历经30多年的风风雨雨,并逐渐发展成为我国国民经济的支柱性产业。但由于起步晚发展急促,我国房地产市场正显现出一系列损害民生、危害消费
恐龙的灭绝有多种推测和假说。本文综述了近些年来提出的五种“中毒说”,诸如植物生物碱中毒说、有毒元素中毒说、有毒气体中毒说、放射性铱元素中毒说以及缺乏解毒功能说。
在考虑参与方地位非对等情况下,利用讨价还价博弈模型,研究不完全信息条件下,不同发起主体的PPP项目政府和社会资本方的风险最优分担机制。研究结果表明:政府方和社会资本方
中韩两国在地理位置上距离非常近,且文化相似,有着两千多年的友好交流历史。特别是到了清代,清王朝对朝鲜王朝实行历史上罕见的友好政策,朝鲜王朝先后向中国派遣600多次使节
随着管理信息系统(MIS)的普及,数据库的安全问题必然成为众多企业关心的问题。本文从数据库数据的完整性、数据的备份和恢复、数据库系统不被非法用户侵入、数据库的审计、数据