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胰腺癌是恶性程度最高的消化道肿瘤之一,发病率和死亡率较高。胰腺癌早期诊断困难、治疗手段有限、预后极差。造成不良预后的一个主要原因是胰腺癌对化疗药物的耐药性。目前以吉西他滨为基础的化疗方案是胰腺癌术后辅助治疗、新辅助治疗和晚期化疗的一线方案,但只有少部分病人能从化疗中获益,胰腺癌对吉西他滨的原发和获得性耐药是影响疗效的主要原因。因此,对胰腺癌吉西他滨耐药的机制进行深入研究有助于我们发现新的治疗靶标,从而提高化疗效果,改善病人预后。吉西他滨发挥功能的主要机制是促进癌细胞的凋亡,而癌细胞凋亡信号途径的失调是导致吉西他滨耐药的重要原因之一。Bcl-XL是胰腺癌中主要的抗凋亡蛋白,但具体调控机制仍不明确。GATA结合蛋白1(GATA1)是最早发现的GATA转录因子家族成员,在胰腺癌中的功能尚未有报道。我们发现,GATA1在胰腺癌组织中的表达明显高于癌旁组织。高表达GATA1的胰腺癌病人总生存期(OS)和无复发生存期(RF S)较短。GATA 1表达水平可以预测吉西他滨治疗病人的预后,在接受吉西他滨治疗的病人中,高表达GATA1的病人OS和RFS较短,而在未接受西他滨治疗的病人中,GATA1的表达不影响病人的OS和RFS。细胞生长曲线和克隆形成实验表明,GATA1促进胰腺癌细胞增殖;细胞存活曲线和建立的耐药细胞系等实验证明,GATA1促进胰腺癌细胞的原发和获得性耐药。双荧光素酶报告基因和染色质免疫共沉淀实验表明,GATA1通过结合在Bcl-XL的启动子上并促进其转录。流式细胞和裸鼠成瘤等实验发现,GATA1在体外和动物体内通过调控Bcl-XL激活抗凋亡通路,诱导胰腺癌细胞吉西他滨耐药。在Bcl-XL敲低的胰腺癌细胞中,GATA1丧失了促进胰腺癌细胞耐药的功能,因此,GATA1以Bcl-XL依赖的方式调节吉西他滨耐药。在胰腺癌临床标本中,Bcl-XL与GATA1的表达水平呈正相关。生存分析显示,在接受吉西他滨治疗的病人中,Bcl-XL的表达与胰腺癌病人OS和RFS相关。Cox回归分析结果表明,GATA1和Bcl-XL都是胰腺癌的独立预后指标。近期研究发现microRNA通过不同通路调节胰腺癌吉西他滨耐药,但其功能和机制尚未完全阐明。决定吉西他滨治疗效果的另一个重要环节是药物的摄取,吉西他滨进入细胞主要通过人平衡核苷转运体(hENT1)进行转运摄取。目前关于调控hENT1表达水平机制的研究非常少,miRNA对肿瘤细胞中的hENT1表达水平是否起重要调控作用尚不明确。我们通过对吉西他滨耐药细胞株miRNA表达谱测序分析,发现miR-1197表达水平上调。通过细胞存活曲线、克隆形成等实验,我们发现miR-1197在胰腺癌细胞原发和获得性耐药中起重要作用。双荧光素酶报告基因实验证明miR-1197结合在hENT1信使RNA的3’端非翻译区调控其表达。通过Westem blot、流式细胞术和裸鼠皮下成瘤等实验,我们发现,miR-1197在体外和动物体内,通过下调hENT1表达诱导胰腺癌吉西他滨耐药。在胰腺癌临床标本中,miR-1197与hENT1表达呈负相关,生存分析显示miR-1197与接受吉西他滨化疗的胰腺癌病人预后相关。综上所述,我们发现了调控胰腺癌吉西他滨耐药的新的转录因子GATA1和新的microRNA miR-1197,这两种分子分别以抗凋亡和药物转运两种不同的机制,影响胰腺癌对吉西他滨的敏感性,并且在预测临床病人化疗效果和预后方面有显著意义,为胰腺癌吉西他滨耐药机制提供了新的证据,为克服胰腺癌耐药提供了新的思路和潜在靶点。