油松成熟胚子叶—胚轴和下胚轴的不定芽诱导和植株再生的研究

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油松(Pinus tabulaeformis),又名中国松(Chinese pinus),是我国的特有树种,也是我国北方的重要造林树种。本文以油松成熟胚子叶-胚轴段和下胚轴段为研究材料,采用正交试验设计,就其不同段位不定芽诱导、不定芽生长、不定根诱导的技术进行了研究。主要研究结果如下:(1)以油松成熟胚的子叶-胚轴段为起始外植体,不同培养基种类、植物生长调节剂种类及浓度对不定芽诱导均有重要影响。在供试的四种基本培养基中,1/2MS诱导效果最好,其他次之。在1/2MS培养基上附加3.0mg/L 6-BA和0.5mg/L NAA时,不定芽诱导率可达48.3%,平均增殖系数为10,最大增殖系数可达24。(2)以油松成熟胚的下胚轴段为起始外植体诱导不定芽比较困难,不定芽诱导率较低。不同培养基种类、植物生长调节剂种类及浓度对不定芽诱导均有重要影响,在供试的四种基本培养基中,SH诱导效果最好,其它次之。在SH培养基上附加3.0 mg/L的6-BA和0.05mg/LNAA时,不定芽诱导率可达11.65%,且高浓度的NAA对不定芽诱导有抑制作用。(3)子叶-胚轴段的重量及其重量百分比对不定芽诱导均有有较大影响,同时基本培养基的种类会影响外植体的有效利用效率。在子叶-胚轴段重量和重量百分比分别在5.04mg~5.25mg和75.3%~75.6%区间时,不定芽诱导效果最好,当重量百分比为50%时,未见不定芽产生,所以整胚重量的一半并不是最优的诱导重量。同时,在DCR培养基上,不定芽诱导所需的外植体重量和重量百分比都最小,外植体利用率最高。(4)不同外植体类型对不定芽诱导影响差异显著,在相同培养基组合条件下,油松成熟胚的完整胚、子叶-胚轴段、下胚轴段和子叶段均可以产生愈伤组织,其中子叶-胚轴段的愈伤组织诱导率最高可达78.3℅,胚轴段和胚根段则不能产生愈伤组织;完整胚、子叶-胚轴段和下胚轴均可以产生不定芽,其他则不能产生不定芽,其中完整胚的不定芽诱导率为58.3℅,小于子叶-胚轴段和下胚轴段的总和63.3℅。(5)活性炭有利于不定芽的伸长生长,且浓度为2g/L的活性炭对不定芽生长更有利,有效嫩梢(≥2cm)比率最高,可达43.55%。(6)在油松生根诱导试验中发现,在1/4 MS、1/2 MS、1/2 DCR和1/2GD四种基本培养基中,1/4MS诱导率最高,其它次之,说明无机盐浓度较低的培养基更有利于油松不定芽的生根。在IBA浓度为0.15mg/L,NAA浓度为0.15 mg/L时油松不定根诱导效果最好,可达30.45%。
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