梅毒(Syphilis)是由苍白(梅毒)螺旋体引起的慢性、系统性性传播疾病(STD),可侵犯中枢神经系统、损坏骨骼,引起组织和器官破坏,严重者可致残、致死。现已在全世界流行,据WHO估计,全球每年约有1200万新发病例,在我国也增长迅速,已成为报告病例数最多的性病。梅毒可以通过皮肤或黏膜细微破损而进行传播,所以提前、有效的检测是尤为关键的。艾康公司2003年就开发了TP诊断试剂,但是配套的原料含有的片段单一,仅含Tp17,存在漏检风险。现新构建梅毒重组快速检测用抗原,融合重要核心片段,且利用生物素放大系统,不仅提高了原料灵敏度、特异性,降低了原料成本,而且能做到早诊断、早治疗,对于控制和预防梅毒的蔓延及其重要。本文从梅毒众多基因编码蛋白中,筛选其抗原性强的氨基表位(TpN17、TpN47、TpN15),连接其对应的氨基酸序列,融合后导入大肠杆菌载体中,利用IPTG诱导,培养后收获菌体,进行纯化,收集纯度较高的目的蛋白,进行后续的透析、标记、透析等,获得最终目的产物,用其标记乳胶颗粒,利用快速诊断平台,进行功能性评估,筛选出配对的梅毒乳胶原料。构建的目的抗原中,其对应的基因序列融合了TpN17、TpN47、TpN15中的优势表位。且目的蛋白表达于上清中,利用HIS标签,过Ni-NTA柱纯化出了纯度≥85%的目的蛋白。将其标记乳胶颗粒,利用快速层析系统,进行一系列临床检测,其灵敏度达到100%,特异性达到99.38%,优于现在生产上使用的梅毒老系列检测试剂,提高了产品性能,大大增强了市场竞争力。