诱导子对东北刺人参不定根中有效物质含量的影响及抗氧化活性研究

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东北刺人参含有多糖、酚及黄酮等多种有效物质,具有极高的药用价值,但其栽培困难,野生资源短缺,植物细胞在培养过程中有效物质产量是有限的,远远达不到预期目标。因此,本研究利用诱导子提高生物反应器内东北刺人参不定根中多糖、酚及黄酮产量,同时,探明其抗氧化特性,为今后东北刺人参产品开发提供另一种材料来源。本试验选用茉莉酸甲酯(MeJA)、水杨酸(SA)和普鲁兰多糖(PA)三种诱导子对悬浮培养的东北刺人参不定根进行处理。在不定根培养第40 d分别添加不同浓度的MeJA和SA,发现当MeJA浓度为200 μM时,可获得大量的多糖、酚及黄酮,100μM的SA对不定根中酚和黄酮的积累有促进作用,但对多糖的产生没有影响。PA在培养第Od处理的最佳浓度为150 mg·L-1,培养第40 d处理的最佳浓度为200 mg·L-1。利用200 μM的MeJA和100 μM的SA对培养的不定根进行不同天数的处理,发现MeJA和SA处理时间显著的影响有效物质的积累,且有效物质含量变化趋势一致,均在处理4 d时多糖、酚及黄酮含量出现最高值;将三种诱导子的最佳浓度及其最佳浓度的一半进行两两组合,在不定根培养第40 d添加并处理4 d,发现使用单一诱导子MeJA更适于有效物质积累,显著优于其它处理。生物反应器培养时可获得大量的有效物质,在对反应器内不定根培养过程中有效物质含量及产量调查时,发现培养第30 d时多糖、酚及黄酮含量最高,培养第40 d时多糖、酚及黄酮产量出现最大值,因此,利用MeJA诱导反应器培养不定根时,选择这两个时间段进行添加,研究处理时间对有效物质积累的影响,发现反应器培养第30 d添加200 μM MeJA处理第8 d最有利于刺人参不定根中多糖、酚及黄酮的积累,此时,产量出现最高值分别为3135.35、573.76和1868.93 mg·L-1,是未处理的1.8、2.0、2.5倍。比较MeJA处理的不定根和东北刺人参栽培3年的根中有效物质含量,发现MeJA处理的不定根中多糖、酚及黄酮含量显著高于栽培根,分别是栽培根的1.8倍、2.5倍和5.0倍。同时,探明两种材料的抗氧化性,结果显示MeJA处理的醇提物对DPPH清除能力、铁离子螯合能力和还原能力较高,在相同浓度条件下,均比栽培根醇提物高。由此可见,MeJA的添加促进了不定根中有效物质含量积累,进而促使抗氧化活性得到一定程度的增强,说明多糖、酚及黄酮中的某些成分与抗氧化活性有一定相关性。
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