新型N-糖链受体的合成及其应用

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近年来,人们研究发现N-连接糖链与细胞癌症的发生和转移以及造血功能损伤有密切关联,因此对于N-连接糖链的结构与生物功能方面的研究日趋引起学者们的关注。但是,由于糖分子本身不含有π-π共轭结构,因而不能对其进行紫外或者荧光检测;同时由于已经开发出来的寡糖衍生化试剂总是存在衍生反应难控制或者质谱检测灵敏度低等问题,不能满足当前糖生物学分析的需要。因此,开发具有质谱响应灵敏性高的新型衍生化试剂及探索其应用于糖蛋白中N-糖链的检测有着重要意义。本论文重点研究了五种含有Boc-Asn-GlcNAc单元的新型受体对含有N-糖链的糖类物质进行分析,合成的受体具有紫外吸收,水溶性好,带有正电荷易于离子化的特点,能够有效的提高其糖链转移率,并具有较高的质谱响应;并对受体与N-糖链的反应条件和质谱检测条件进行了优化,对检测方法进行了考察。本论文主要做了以下研究:1.合成了四种用于检测N-连接糖链的受体,优化了各受体的合成条件以及纯化方法,并对目标化合物进行了核磁、质谱、紫外、熔点等表征。2.由于内切酶Endo-M可以作用于糖肽内侧的GlcNAc-GlcNAc之间的糖苷键,使复杂的糖肽转变成寡糖,我们利用所合成的受体对寡糖链进行修饰,进而实现对样品中寡糖的分析及检测。本文初步探讨了在Endo-M作用下五种受体对唾液酸糖肽中的寡糖的检测,由于所合成的受体易离子化或已带电荷,所以可以很大程度地提高糖链衍生物在质谱检测器上的检测灵敏度。3.合成受体过程中的中间产物MDPZ, TFPZ可以作为衍生化试剂应用于检测羧酸类物质,摸索了衍生化方法,并建立了一种简便、快速的MS检测方法。
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