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铬(Chromium,Cr)在自然界的主要存在形式是金属铬、六价铬和三价铬,其中六价铬在工业生产中应用最为广泛。工人们接触六价铬的主要途径是皮肤接触和呼吸道吸入接触,六价铬对职业健康有着极大的危害,工人长期接触六价铬可诱发肺癌。端粒(Telomere)是真核生物染色体末端的DNA-蛋白结构,它的长度关系着细胞的衰老与死亡,并与癌症的发生发展有着紧密的关联。端粒长度是由端粒结合蛋白和端粒酶所共同调控的,端粒酶通过与端粒末端结合来延伸端粒的长度。端粒结合蛋白可以通过与端粒末端的特异性结合来改变端粒的结构,从而抑制端粒与端粒酶的结合,达到阻止端粒延长的目的。目的：研究采用不同浓度的重铬酸钾溶液对大鼠进行吸入染毒,分析六价铬对大鼠端粒长度及端粒结合蛋白TRF1、TRF2表达的影响,为以后进一步研究六价铬致癌的机制提供理论依据。方法：1.大鼠的急性吸入毒性试验选用健康成年SD大鼠40只,体重180～220g。随机分为4组,每组雌雄各半,根据预实验和文献,将染毒剂量设计为1000mg/m3、2150mg/m3、4640mg/m3和10000mg/m3,通过吸入染毒的方式对大鼠进行处理。染毒后观察14d,记录动物的症状和死亡情况。对死亡动物进行大体解剖和病理学检查。根据大鼠各组死亡情况,利用Horn氏法求出重铬酸钾对大鼠的LC5o及其95%可信区间。2.大鼠的短期重复染毒毒性试验健康成年SD大鼠80只,体重180～220g,随机分为4组,每组20只。根据所得LC50,设计高、中、低3个剂量组,分别为1/10LC50、1/31.6LC50、1/100LC50,用蒸馏水做空白对照。通过吸入染毒的方式连续染毒7d,记录染毒时动物的症状和死亡情况。3.石墨炉原子吸收光谱法测大鼠血液中铬的含量重复染毒毒性试验后,取各组大鼠血液,利用石墨炉原子吸收光谱法测定大鼠血液中铬的含量。4.通过实时定量PCR对大鼠端粒长度进行测定重复染毒毒性试验后,取各剂量组大鼠右肺,从肺组织中提取出DNA,进行实时定量PCR分析,根据Ct值计算出大鼠的相对端粒长度。5.SP免疫组化法检测大鼠TRF1、TRF2蛋白的表达重复染毒毒性试验后,取各剂量组大鼠左肺,固定包埋后,通过免疫组化法测其中TRF1、TRF2蛋白的表达。6.统计分析运用SPSS12.0统计软件进行数据分析,用t检验来分析不同浓度重铬酸钾对大鼠血铬含量和端粒长度的影响；单因素方差分析来比较组间均值的差异,各组间两两比较时用Bonfferoni来校正；用Levene检验来进行方差齐性检验；采用Spearman秩相关进行相关性分析。所有统计检验均为双侧,检验水准为α=0.05。结果：1.急性吸入毒性试验在实验观察期内,4640mg/m3剂量组,雌雄大鼠各死亡3只；10000mg/m3剂量组,10只大鼠全部死亡,其余各组无死亡。由此查Horn氏表,可得重铬酸钾对大鼠的LC5o为4300mg/m3,根据LC50设计短期重复染毒毒性试验的染毒剂量分别是430mg/m3、136mg/m3和43mg/m3。2.短期重复染毒毒性试验中,中剂量组死亡2只大鼠,高剂量组死亡4只大鼠。3.高、中、低剂量组和对照组中大鼠血铬的含量分别为：2534.11±150.98mg/L、796.40±126.55mg/L、97.12±6.88mg/L、14.98±2.39mg/L,多组间比较差异具有统计学意义(F=32.63,P<0.05)。4.实时定量PCR结果：高、中、低剂量组和对照组中大鼠端粒相对长度分别为0.20±0.04、0.39±0.05、0.61±0.06、1.13±0.11,多组间比较差异具有统计学意义(F=664.041,P<0.05)。高、中、低剂量组和对照组的端粒长度与血铬含量呈负相关(r=-0.78、-0.56、-0.52、-0.45,均P<0.05)。5.免疫组化结果：高、中、低剂量组和对照组TRF1蛋白的平均光密度值依次是：0.36±0.03、0.32±0.02、0.29±0.01、0.28±0.02,组间比较差异均具有统计学意义(F=125.20,P<0.05),TRF2蛋白的平均光密度值依次是：0.25±0.01、0.23±0.03、0.20±0.04、0.19±0.01,组间比较差异均具有统计学意义(F=64.71,P<0.05)。其中,高、低剂量组和对照组TRF1与TRF2蛋白的表达呈正相关(r=0.77、0.59、0.51,均P<0.05)；高、中、低剂量组端粒长度与TRF1蛋白的表达呈负相关(r=0.77、-0.56、-0.51,均P<0.05)；中、低剂量组和对照组端粒长度与TRF2蛋白的表达呈正相关(r=-0.74、-0.70、-0.50,均P<0.05)。结论：重铬酸钾能够影响大鼠肺组织中端粒的功能,使其相对长度变短,并使端粒结合蛋白TRF1和TRF2表达量升高。