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中草药的研究在中国具有数千年悠久历史,是中华民族文化遗产中的瑰宝。在世界四大传统医药研究体系中,中医药学体系理论最完整、疗效最确切、实践最丰富。在中药资源方面,我国现有中药种类已达到12807种,仅对320种常用植物类药统计,总储备量高达8.5×106吨,全国药材种植面积超过3.9×105公顷。目前,世界上有100多个国家在运用中医药,全世界80%的人使用天然医药,随着“回归自然”热潮的兴起,中药越来越被人们所认可。然而在国际每年近600亿美元的销售额中,我国仅占不到3%,且绝大多数都是原料初级品。因此,发展我国中医药现代化迫在眉睫,研究一种可定性定量测定中草药的分析方法至关重要。
本文依据化学振荡理论,建立了三种体系的中草药电化学指纹图谱,主要研究内容包括:
1.建立了BrO3--Mn2+-H+-丙二酸的振荡体系,其最佳测试条件:0.55mol/LH2SO4、0.015mol/LMnSO4、0.04mol/LKBrO3、0.05mol/L丙二酸。37℃,搅拌速度120r/min,浸出时间20min,中草药加入量1.00g/50mL。基于该体系获得黄芪等28种中草药的电化学图谱,具有良好的重现性,RSD<3.60%,讨论了电化学图谱用于中草药不同部位、不同产地、不同剂型、复方的鉴别。实验发现,黄芪加入量与振幅、最高电位和周期在0.50-2.00g范围内呈线性关系。添加茶水、牛奶和酒精,均对振荡具有抑制作用,糖水略有促进作用,表面活性剂TX-100可缩短测试时间,最佳浓度为5.0×10-4mol/L。首次通过对Br-浓度的在线监测,验证了对中草药电化学图谱产生机理的推测,采用循环伏安法证明了中草药的加入改变了体系氧化还原电位。
2.建立的BrO3--Fe(Phen)32+-H+-丙二酸振荡体系的最佳测试条件:0.024mol/LFe(Phen)32+、0.55mol/LH2SO4、0.04mol/LKBrO3、0.050mol/L丙二酸,37℃,搅拌速度120r/min,浸出时间20min,中草药加入量1.00g/50mL。谱图具有良好的重现性,RSD<2.60%。在此体系下获得24种中草药电化学图谱。讨论了电化学图谱用于中草药不同产地、不同剂型、复方的鉴别。黄芪加入量与振荡期、最高电位在0.50-1.75g范围内呈线性关系。添加茶水、可乐、牛奶和酒精均对振荡具有抑制作用。亦通过电化学分析方法探索了中草药电化学图谱产生的机理。
3.基于BrO3--Ce4+-H+-丙酮振荡体系的最佳测试条件:7.4×10-3mol/LCe(SO4)2、0.65mol/LH2SO4、0.04mol/LKBrO3、0.108mol/L丙酮,温度37℃,搅拌速度120r/min,浸出时间20min,中药加入量为1.50g/50mL。获得的22种中草药的电化学图谱谱图均具有良好的重现性,RSD<3.10%。讨论了该体系的电化学图谱对于中草药不同产地、不同剂型及复方的鉴别。实验发现,陈皮加入量与振荡期、最高电位在0.50-2.00g范围内呈线性关系。添加物茶水、牛奶和酒精,均对振荡具有抑制作用,表面活性剂TX-100可缩短测试时间,最佳浓度为8.0×10-4mol/L。通过循环伏安法验证了中草药的有效成分与振荡体系中组分的氧化还原作用。
4.通过分析三种振荡体系测定同种中草药的电化学图谱参数比较,发现同种中草药不同体系下谱图各异,不同体系具有不同测试范围及优点。相对而言,BrO3--Mn2+-H+-丙二酸体系具有较短的诱导期和适中的振荡期,周期小因而具有较多的峰数,所以可更好的反映图谱特征。采用C#+SQLServer建立的谱图数据库,实现了中草药识别的数据动态管理,具有智能、高效的数据处理能力和良好的人机沟通界面。
基于化学振荡体系的中草药电化学指纹图谱在中草药识别、定量测定、质量控制及药效研究方面具有良好的应用前景。