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目的:1.从基因和蛋白水平,研究Livin与Caspase-3在喉癌、癌旁及正常组织中的表达及其与临床病理学特征的关系,并对这两者的相关性进行分析。2.探讨Livin与Caspase-3在肿瘤细胞凋亡中的作用机制。所选病历为2010年--2011年山西医科大学第一医院及山西省肿瘤医院病历资料完全确诊为喉癌患者,声门上型30例,声门型16例;临床分期:T1期7例,T期10例,T3期15例, T4期14例;按病理分化程度:高分化13例,中分化18例,低分化15例;有淋巴结转移的25例,无淋巴结转移的21例。方法:1.选取46例喉癌、30例癌旁组织及8例正常组织,采用SP免疫组化方法检测Livin与Caspase-3的表达情况,并结合临床,分析其临床病理参数的关系。2.选取46例喉癌、30例癌旁组织及8例正常组织,应用逆转录PCR(RT-PCR)法检测Livin与Caspase-3的表达情况。结果t1.免疫组化检测结果:Livin和Caspase-3蛋白均在细胞的胞质中表达,Livin在喉癌组织、癌旁组织及正常组织中阳性表达率依次降低,分别为63.04%、36.67%、12.50%,通过卡方检验对组间进行比较显示,喉癌与其他两组有显著统计学差异(P<0.01),后两者比较无明显统计学差异(P>0.05);而Caspase-3在喉癌组织、癌旁组织及正常组织的阳性表达率依次增高,分别为28.26%、40.00%、75.00%,同样用卡方检验进行组间比较看到,有显著统计学差异(P<0.01),前两者比较无明显统计学差异(P>0.05)。Livin和Caspase-3在喉癌中蛋白的表达均与肿瘤的临床分期、病理组织学分级,有无淋巴结转移情况有相关性(P<0.05),而与患者的年龄、性别、肿瘤的部位无相关(P>0.05)。2RT-PCR法检测结果:LivinmRNA在喉癌组织、癌旁组织及正常组织中的表达强度依次减弱,并测得平均光密度值(IOD)分别为0.2807±0.0524、0.0832±0.0332、0.0754±0.0235,通过方差分析得到,喉癌组织与其他两组比较有明显统计学差异(P<0.01),后两者比较无差异(P>0.05),而Caspase-3mRNA在喉癌组织、癌旁组织及正常组织中的表达依次增强,并测得IOD分别为0.1053±0.0277、0.2502±0.0552、0.3024±0.0431,通过方差分析得到,喉癌组织与其他两组比较有明显统计学差异(P<0.01),后两者比较无差异(P>0.05)。Livin和Caspase-3在喉癌中基因的表达均与肿瘤的临床分期、病理组织学分级,有无淋巴结转移情况有相关性(P<0.05),而与患者的年龄、性别、肿瘤的部位无相关(P>0.05)。3.Livin和Caspase-3通过免疫组化法得到的相关系数r=-0.767,通过RT-PCR技术测得的相关系数r=-0.876。由此得到,Livin和Caspase-3之间存在负相关性。结论:1.不管从蛋白水平还是基因水平均得出,Livin在喉癌组织中呈高表达,而Caspase-3在喉癌组织中则为低表达。2.Livin与Caspase-3基因的表达与肿瘤的临床分期、分化程度及有无淋巴结转移有着显著关系。3.Livin与Caspase-3之间存在负相关性。4Livin与Caspase-3在喉癌的发生、发展过程中发挥重要作用。5Livin可有望成为喉癌治疗的潜在靶点。6.本实验也可为临床以距癌肿边缘5mm作为粘膜安全切缘的理论提供依据。