自体牙移植术是一种将自体牙从原位置移植到受区牙槽窝，用来治疗牙列缺损的一种外科治疗方法。有学者报道牙移植术的手术成功率超过了90%，提示该技术作为治疗牙列缺损的外科手段之一，具有广阔的前景和应用价值。虽然牙移植术有着较高的手术成功率，仍有许多因素影响移植牙的存活时间，如移植牙的离体时间、移植牙牙根与受区牙槽骨的外形、患者年龄等。所有因素都可以归结为牙周组织的状况和愈合程度μ。因此，改善牙周组织的状况，提高其愈合能力是提高牙移植手术成功率的主要方法之一。牙周膜干细胞是存在于牙周组织中具有多向分化潜能、在牙周组织损伤修复中起重要作用的一种成体干细胞。通过调节牙周膜干细胞的细胞活性，可以增强牙移植术后牙周组织的修复能力，提高牙移植术的手术成功率。然而牙周膜干细胞的细胞来源是一个主要问题，需要提前安排手术取材，才能得到个体化的牙周膜干细胞。骨髓间充质干细胞和牙周膜干细胞类似，也是一种来源于中胚层的成体干细胞，具有多向分化的能力，可以用作牙周组织损伤修复的种子细胞，提高牙移植术的手术成功率。但是骨髓间充质干细胞的取材也是有创μ的，并不能适用于所有病例。脐带间充质干细胞μ或许是最佳选择。来源于脐带组织的脐带间充质干细胞具有细胞来源丰富、无创取材、易于获取、无论理学限制、低免疫原性等特性，很适合作为一种新型种子细胞，用于牙周组织损伤的修复，提高牙移植术的手术成功率。本研究拟通过体外实验，研究并细化了脐带间充质干细胞的成骨特性；通过体内实验，模拟牙周组织愈合情况，研究脐带间充质干细胞是否适合用于提高牙移植术的手术成功率。实验一人脐带间充质干细胞的原代培养及鉴定目的：通过原代培养得到本研究所需的脐带间充质干细胞，并对细胞性质进行鉴定。方法：通过酶消化法进行脐带间充质干细胞的原代培养；通过流式细胞技术对获得细胞的表面CD分子进行鉴定，包括CD29、CD146、CD105、CD34、CD44、CD45。结果：通过酶消化法可以获得大量的人脐带间充质干细胞，培养方法简单易行，结果稳定；流式鉴定结果显示人脐带间充质干细胞与其他间充质干细胞类似，表达干细胞表面标记物CD29（99.8%）、CD44（99.9%）、CD14（692.8）、CD105（98.9%），但不表达造血谱系标记物CD34(1.52%)、CD45（1.76%）。结论：通过酶消化法可以顺利的得到人脐带间充质干细胞，该细胞高表达间充质干细胞表面标记物，可以用于后期的实验研究。实验二人脐带间充质干细胞成骨分化的体外实验研究目的：研究人脐带间充质干细胞的成骨分化及其在成骨诱导过程中干细胞和成骨相关标记物的变化情况。方法：通过茜素红染色、Van Kossa染色和细胞免疫荧光技术对成骨诱导后的细胞进行鉴定；在成骨诱导过程中设立时间点（0d、7d、14d、21d），通过流式细胞技术对干细胞标记物CD146和SOX2进行检测；对碱性磷酸酶、CD146/SOX2（mRNA水平）、骨桥蛋白/骨涎蛋白/Runx2（mRNA水平和蛋白水平）进行检测。结果：对细胞进行成骨诱导21天后茜素红、Van Kossa染色阳性，免疫荧光染色检测到胞浆内大量表达骨桥蛋白和骨涎蛋白；干细胞标记物CD146和SOX2在诱导过程中呈下降趋势；碱性磷酸酶活性在第7天时即表现出具有统计学差异的升高，骨桥蛋白/骨涎蛋白（mRNA水平和蛋白水平）在成骨诱导过程中呈上升趋势，7天或14天既有显著性差异；Runx2（蛋白水平）在第7天时达到峰值，随后下降。结论：人脐带间充质干细胞的成骨分化过程是一个连续的过程；体外诱导7d后成骨分化进行已经全面启动；经过诱导的人脐带间充质干细胞比未诱导的细胞更适合用于骨缺损修复。实验三应用人脐带间充质干细胞模拟牙移植术后牙周组织再生的体内实验研究目的：通过体内实验模拟牙移植术后牙周组织的愈合情况。方法：将7d预诱导的干细胞做为实验组μ，无诱导的干细胞为对照组μ。牙本质、生物蛋白胶和人脐带间充质干细胞混合制作成一种植入复合体μ，通过植入免疫缺陷小鼠的皮下，8周后取材，观察其生长情况。结果：实验组在牙本质表面形成了一层细胞聚集区，免疫组织化学染色显示OPN呈强阳性；外侧为与牙本质垂直向平行排列的纤维样细胞层，胞核被拉长；Masson三色染色显示该新生层富含胶原纤维或类骨样结构。而在对照组并未观察到该现象的存在。结论：经过预诱导7d的人脐带间充质干细胞更适合用于牙周损伤的修复，可以用来提高牙移植术的手术成功率。