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FATP1作为脂肪酸转运蛋白,在机体脂肪酸转运摄取方面发挥着重要作用。本论文从"脂肪酸转运影响脂肪沉积"的角度出发,利用活体和离体试验,在核酸、蛋白、细胞、组织等水平系统研究了FATP1在糖皮质激素(DEX)调控肉鸡骨骼肌脂肪异位沉积中的作用及机制。1.FATP1在应激肉鸡骨骼肌脂肪代谢中的作用。处理组根据肉鸡体重注射DEX。结果表明,DEX处理会导致肉鸡肌肉组织FATP1的mRNA水平升高,脂肪沉积量增多,血液中VLDL和INS含量显著升高。腿肌糖皮质激素受体(GR)、脂联素受体(ADPNR)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)的mRNA水平也升高。由这些结果推测,DEX调控骨骼肌的FATP1促进脂肪摄取可能是通过GR-ADPNR-PPARα通路实现的。2.脂肪水平对糖皮质激素调控FATP1的影响。分别用不同脂肪水平的日粮饲喂肉鸡,35日龄时用DEX处理。试验结果表明,低脂日粮饲喂肉鸡组用DEX处理后肌肉组织TG沉积量增多,但高脂日粮饲喂肉鸡组用DEX处理后各组织脂肪沉积量无显著变化;低脂日粮饲喂肉鸡并用DEX处理后,肉鸡肌肉组织GR、ADPNR、PPARα和FATP1的mRNA水平与组织TG沉积量有相同变化趋势。但是,这种趋势在饲喂高脂日粮并用DEX处理后的肉鸡腿肌上表现不明显。由此可以推出,不同日粮处理下DEX对肌肉GR-ADPNR-PPARα-FAPT1通路基因水平的影响并不一致。3.脂肪酸类型对糖皮质激素调控FATP1的影响。利用添加了相同浓度油酸和棕榈酸的条件培养基分别培养成肌细胞,细胞分化至80%左右分别用不同浓度的DEX处理。结果表明,用饱和脂肪酸培养的细胞用DEX处理后,细胞脂肪沉积增多,而不饱和脂肪酸培养的细胞用DEX处理后细胞脂肪沉积量有所下降;检测细胞AKT蛋白的磷酸化水平,结果显示DEX处理对其无显著影响;油酸培养细胞DEX处理后检测到相关基因的mRNA水平无显著差异,而棕榈酸培养的成肌细胞用DEX处理后检测到GR、ADPNR、PPARα和FATP1的mRNA水平变化趋势与细胞中TG沉积量的变化趋势基本一致。这说明不同脂肪酸类型会影响DEX对FATP1的调控作用,进而影响细胞TG的沉积量。4.糖皮质激素通过FATP1调控成肌细胞脂肪沉积的途径。单独DEX处理成肌细胞,发现FATP1和PPARα的mRNA水平无显著变化;利用添加了相同浓度油酸和棕榈酸的条件培养基分别培养成肌细胞,细胞分化至80%左右分别利用特异性抑制剂RU486、U0126、GW6471特异性抑制GR、ERK2/MAPK和PPARα在细胞中的作用,并用DEX处理。发现油酸培养的成肌细胞用抑制剂和DEX处理后脂肪酸摄取无显著差异,棕榈酸培养的成肌细胞用抑制剂处理后脂肪酸摄取能力下降。这说明DEX会通过GR-PPARα途径或ERK2/MAPK-PPARα途径调控细胞对饱和脂肪酸的摄取。综上所述,糖皮质激素可能通过升高FATP1的mRNA水平促进细胞对脂肪酸的转运摄取,进而导致脂肪沉积。日粮不同脂肪水平会影响到糖皮质激素通过FATP1对肉鸡骨骼肌脂肪沉积的调控作用,细胞培养底物的脂肪酸类型也会影响到糖皮质激素通过FATP1对成肌细胞脂肪沉积的调控作用。糖皮质激素应激条件下,细胞倾向于通过GR-PPARα或ERK2/MAPK-PPARα通路摄取饱和脂肪酸。本研究揭示了应激导致骨骼肌脂肪异位沉积的调控靶点,阐明了日粮脂肪与糖皮质激素的相互作用。