长角血蜱和嗜群血蜱ITS-2、COI和COII基因的序列分析研究

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蜱隶属于节肢动物门Arthropoda,蛛形纲Arachnida,蜱螨亚纲Acari,寄螨目Parasitiformes,蜱总科Ixodoidea,是陆生脊椎动物的专性、非永久性体外寄生虫。它分布广泛,主要侵袭哺乳类、鸟类、爬行类,甚至两栖类动物。蜱除直接侵袭人和动物外,它还是人和动物多种重要疾病(包括真菌、病毒、立克次氏体、螺旋体、细菌和原虫)的传播媒介。本试验应用聚合酶链式反应(PCR)技术从长角血蜱和嗜群血蜱总DNA中扩增得到核糖体第二内部转录间隔区基因(ITS-2)、线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(CoⅠ)和线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅱ(COⅡ),并将其分别克隆得到的长角血蜱和嗜群血蜱的ITS-2基因、COⅠ和COⅡ基因进行了序列测定与分析,并结合GenBank已登录的相关序列,进行了分子系统学研究,从分子水平上探讨了长角血蜱和嗜群血蜱的分类与进化关系。将三组基因序列进行了比较分析,结果表明:本文测定的长角血蜱的ITS-2基因与澳大利亚所测定的长角血蜱ITS-2核苷酸同源性为99.4%,而与嗜群血蜱的同源性仅为88.3%;基于COⅠ和COⅡ基因,长角血蜱和嗜群血蜱的同源性分别为87.5%和90.4%,长角血蜱与褐黄血蜱(AB075954)的同源性分别为84.2%和94.6%,嗜群血蜱与褐黄血蜱(AB075954)同源性分别为76.8%和88.2%。三个基因的序列分析均表明:长角血蜱和嗜群血蜱是两个不同的种。用距离法和最大简约法构建了三种不同的分子系统树,三种树的拓扑结构均存在较大的相似性。基于ITS-2基因序列,以疥螨属的兔疥螨作为外群,长角血蜱和嗜群血蜱在每种系统树上都聚集在一起,自举值为(100,99,100)。基于COⅠ基因,以瓦螨属的狄氏瓦螨作为外群,在N-J法和MP法构建的系统树中长角血蜱和嗜群血蜱都是聚集在一起,自举值(99,96);而在UPGMA法构建的系统树中两者距离有所变化,长角血蜱和血红扇头蜱聚集在一起,自举值(69,78)。基于COⅡ基因,以瓦螨属的狄氏瓦螨作为外群,每种系统树上长角血蜱和褐黄血蜱、嗜群血蜱都相聚居,自举值(90,89,60)。实验结果表明长角血蜱和嗜群血蜱是血蜱属中亲缘关系较近的两个有效种。
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