年龄与性别对高密度脂蛋白功能影响的研究

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目的:研究年龄和性别对血浆高密度脂蛋白胆固醇(High-density lipoprotein–cholesterol,HDL-C)抗氧化、抗炎、抗凋亡和介导胆固醇外排功能的影响。方法:1.研究对象随机选取年龄20~59岁,平均(37.3±9.6)男性60例为中青年男性组,女性60例为中青年女性组;60~79岁,平均(68.7±8.4)男性60例为老年男性组,女性60例老年女性组。排除标准:根据病史、体格检查、辅助检查等排除心脑血管疾病、糖尿病、肝肾功能异常、急性感染性疾病以及服用雌激素、降血脂药、抗生素等。2.检测各组血脂生化指标:HDL-C、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglycerides,TG)等。将各组血浆超速离心获取HDL。3.通过检测各组HDL对抗铜离子(Cu2+)诱导的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)产生丙二醛(MDA)氧化的能力。4.通过检测内皮细胞与单核细胞(THP1)的粘附试验检测HDL对内皮细胞的保护作用;Western blot检测内皮细胞粘附分子VCAM-1和ICAM-1的表达。5.通过MTT法检测人脐静脉内皮细胞的相对细胞存活率与使用流式细胞仪测细胞的凋亡水平来检测HDL的抗凋亡作用。6.通过HDL介导的巨噬细胞内胆固醇外流率的实验检测其促胆固醇外排功能。结果:1.血脂指标测定结果:老年女性组与中青年男性组、中青年女性组、老年男性组比较,LDL-C、TG、TC水平均升高(P<0.05);中青年女性组HDL-C含量升高,与中青年男性组、老年男性组、老年女性组比较有统计学意义(P<0.05)。2.体外细胞实验:(1)HDL抗氧化实验:老年女性组与中青年男性组、中青年女性组及老年男性组比较,MDA含量升高(均P<0.05);老年男性组与中青年男性组、中青年女性组比较,MDA含量升高(均P<0.05);中青年男性组与中青年女性组比较,MDA含量比较无统计学意义(P>0.05)。(2)HDL抗炎实验:老年组(老年男性组与老年女性组平均值)与中青年组(中青年男性组与中青年女性组平均值)比较,单核细胞粘附数升高(P<0.05),同龄男女组间比较无统计学意义(P>0.05);老年组黏附分子VCAM-1和ICAM-1的表达高于中青年组(P<0.05),同龄男女组间表达比较无统计学意义(P>0.05)。(3)HDL抗凋亡实验:流式细胞仪检测显示中青年组HDL保护后的内皮细胞相对存活率升高与老年组比较有统计学意义(P<0.05);MTT比色法检测显示中青年组HDL保护后的细胞活力较老年组高(P<0.05),同龄男女组间比较无统计学意义(P>0.05)。(4)HDL促胆固醇外排功能检测:老年组较中青年组外排率降低(P<0.05),其中老年组女性外排率降低较显著,差异有统计学意义(P<0.05),而单纯老年组男性较青年组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:1.年龄是高密度脂蛋白含量与功能的重要影响因素,增龄不仅降低了高密度脂蛋白胆固醇的含量,而且对其抗氧化、抗炎、抗凋亡和促进胆固醇外排功能存在影响,导致高密度脂蛋白功能障碍。2.性别HDL功能的影响表现为,老年女性HDL的抗氧化能力和诱导胆固醇外排能力低于老年男性,余性别年龄间比较均无差异,提示增龄对老年女性HDL功能影响更为明显。
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