副结核病(paratuberculosis)是由副结核分支杆菌(mycobacterium paratuberculosis MP)引起牛、羊、鹿、骆驼等以反刍动物为主多种动物共患的一种慢性、消耗性传染病，其临床症状以持续性腹泻和慢性消瘦为特征。1895年由Johne首先发现本病，因此又命名为Johne’s disease(约内氏病)。世界动物卫生组织(OIE)将其划为B类传染病，我国也将其划为Ⅱ类传染病。 副结核病潜伏期长，有的终生感染而不表现出临床症状。至目前为止，尚无治疗该病的有效方法，防治该病的主要方法是检测、隔离和淘汰病畜。因此建立和研究简便、快速、有效的检测方法己成为人们感兴趣的研究内容之一。本论文主要围绕羊副结核病诊断方法ELISA的建立和应用进行了一系列的研究，对于羊副结核病的诊断和预防方面有学术意义和应用价值。全文共分三章，分述如下： 第一章 本章综述了副结核病概况及ELISA的基本原理。副结核病广泛流行于世界各国，不仅给畜牧业带来很大的经济损失，而且对动物性产品的开发有不利的影响，同时对人类的健康也有潜在的威胁。从建立到现在的三十多年里，ELISA技术已经日趋成熟。ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。 第二章 本章建立了羊副结核病ELISA诊断方法以及其初步的应用。制备亲和抗原。被检血清以草分支杆菌吸收抗原进行吸收。制备兔抗绵羊IgG抗体和兔抗山羊IgG抗体并以辣根过氧化物酶分别标记，制备兔抗绵羊酶标抗体和兔抗山羊酶标抗体。建立用于检测羊副结核病血清抗体的间接ELISA诊断方法。并对6个不同地区的绵羊和山羊进行血清学调查。以及对绵羊和山羊进行ELISA检测时使用不同的酶标抗体对酶标值的影响。同时将新建立的ELISA诊断方法与常规的变态反应、补反(CF)和琼扩(AGID)进行比较。ELISA阳性检出率为10.8％、变态反应阳性检出率为4.9％、补反阳性检出率为6.6％、琼扩阳性检出率为4.1％。 第三章 经研究得出结论羊副结核ELISA方法是一种敏感性好、特异性高、稳定、快速的检测手段。同时得出不同的酶标抗体对绵羊和山羊副结核病的检测可能有一定的影响。