论文部分内容阅读
目的:本实验通过建立因庆大霉素诱发的耳、肾毒性大鼠模型,观察三焦经络的良性电针刺激、从肾论治方药及针药并举三种防治方法分别对庆大霉素诱发的耳肾损伤大鼠耳蜗、肾组织形态学的影响,对肾脏组织中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、巨噬细胞炎性蛋白-2（MIP-2）含量及血清中血肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）水平的影响,探讨针药并举对庆大霉素诱发耳、肾毒性大鼠的可能作用机制。材料和方法:选择健康雄性SD大鼠40只,适应性喂养一周后进行听性脑干反应（ABR）检测,之后随机分为空白组、模型组、电针组、中药组和针药组,每组8只。空白组生理盐水肌肉注射14d,1次/d,不处理。模型组庆大霉素（120mg/kg）肌肉注射14d,1次/d,不处理。电针组、中药组和针药组庆大霉素剂量和方法同模型组。电针组在造模同时每天给予针刺双侧“翳风”“外关”“阳池”穴,针刺后加电针,留针20min,左右两侧交替进行,1次/d,连续治疗14d。中药组在造模同时每天给予金匮肾气丸灌胃,大鼠灌胃5ml/kg/d,1次/d,连续治疗14d。针药组同时给予电针组和中药组的干预措施。治疗结束后所有大鼠再次进行ABR检测后处死,取耳蜗、肾观察组织形态学的病理变化,酶联免疫吸附测定法检测肾脏组织中TNF-α、MCP-1、MIP-2的含量变化,全自动生化分析仪测定血清中Scr、BUN的水平变化。结果:1.听性脑干反应（ABR）检测结果显示:实验前各组大鼠ABR阈值较低,且五组大鼠ABR反应阈值比较差异无统计学意义（P>0.05）。实验14d后比较:与空白组相比,模型组、电针组、中药组ABR阈值均升高（P<0.01）,针药组的改善较为明显（P<0.05）;与模型组相比,中药组ABR阈值降低（P<0.05）,电针组和针药组的降低更为明显（P<0.01）;与中药组相比,电针组ABR阈值略低,但二者之间差异不显著;与电针组和中药组相比,针药组的下降幅度更显著（P<0.01）。2.苏木素-伊红染色法检测结果显示:观察耳蜗组织病理改变:空白组大鼠耳蜗组织形态正常,螺旋神经节形态结构完整,神经细胞数量、形态正常,毛细胞分布整齐、排列有序;与空白组相比,模型组大鼠耳蜗组织形态结构出现严重损伤现象,螺旋神经节发生明显病理改变,神经细胞数量缺失,边界模糊不清,毛细胞缺失明显,排列紊乱;与模型组相比,中药组、电针组、针药组耳蜗组织形态结构的损伤均有所减轻,螺旋神经节病理变化减轻,细胞数量有少量缺失,界限较清晰,毛细胞数量缺失较少,排列较整齐,其中以针药组的改善效果更为显著。观察肾脏病理改变结果显示:空白组大鼠肾组织形态正常,肾小球及肾小管结构完整。与空白组相比,模型组大鼠出现明显肾损伤现象,肾小管结构异常,可见肾小管上皮细胞空泡变性,且肾间质炎性细胞浸润明显;与模型组相比,电针组、中药组、针药组大鼠肾损伤现象均有一定程度的减轻,炎性细胞浸润减少,以针药组的改善作用更为显著。3.酶联免疫吸附测定法检测结果显示:大鼠肾脏组织中TNF-α含量:与空白组相比,模型组、电针组、中药组、针药组大鼠肾脏组织中TNF-α含量均升高（P<0.01）;与模型组相比,电针组、中药组、针药组TNF-α含量均降低（P<0.01）;与电针组相比,中药组TNF-α含量略低于电针组,但二者之间差异不显著;与电针组和中药组相比,针药组降低更显著（P<0.01）。大鼠肾脏组织中MCP-1含量:与空白组相比,模型组、电针组、中药组大鼠肾脏组织中MCP-1含量均升高（P<0.01）,针药组的改善较为明显（P<0.05）;与模型组相比,电针组、中药组、针药组MCP-1含量均下降（P<0.01）;与电针组相比,中药组MCP-1含量下降（P<0.05）,针药组的下降更明显（P<0.01）;与中药组相比,针药组降低更显著（P<0.01）。大鼠肾脏组织中MIP-2含量:与空白组相比,模型组、电针组、中药组、针药组大鼠肾脏组织中MIP-2含量均升高（P<0.01）;与模型组相比,电针组、中药组、针药组MIP-2均下降（P<0.01）;与电针组相比,中药组、针药组MIP-2含量显著降低（P<0.01）;与中药组相比,针药组降低更显著（P<0.01）。4.血清中Scr、BUN水平检测结果显示:血清中Scr水平:与空白组相比,模型组、电针组、中药组、针药组大鼠血清中Scr水平均升高（P<0.01）;与模型组相比,电针组Scr水平降低（P<0.05）,中药组、针药组降低更为明显（P<0.01）;与电针组相比,中药组、针药组Scr水平明显降低（P<0.01）;与中药组相比,针药组水平降低更显著（P<0.01）。血清中BUN水平:与空白组相比,模型组、电针组、中药组、针药组大鼠血清中BUN水平均升高（P<0.01）;与模型组相比,电针组BUN水平低于模型组,但二者之间差异不显著;与电针组相比,中药组、针药组BUN均明显降低（P<0.01）;与中药组相比,针药组的下降更显著（P<0.01）。结论:1.庆大霉素同时具有耳、肾毒性,可成功诱导大鼠出现耳毒性和肾毒性,建立耳肾损伤模型。2.三焦经络的良性电针刺激能够减轻大鼠由庆大霉素诱发的耳、肾毒性,能够增强从肾论治方药的防治效果。3.基于“肾与三焦相通”理论指导的针药结合的防治方法,可对因庆大霉素所致的肾功能下降起到良好的防治作用,能够明显降低肾脏组织中炎性因子含量,减轻肾脏损伤,并有效改善大鼠的听力损失情况。4.验证了针药并举疗法在防治药源性耳聋中发挥的重要作用。