目的：整联蛋白是一种介导病毒侵入宿主细胞内的细胞受体，在病毒粘附过程中发挥重要作用。本研究利用RNA干扰技术，对口蹄疫病毒（Foot-and-mouthdiseaseveirus,FMDV）受体整联蛋白β6亚基的胞浆域进行修饰，抑制其表达，从而抑制病毒侵入宿主胞内复制。这为后续抗口蹄疫转基因猪的获得奠定了基础。方法：以猪整联蛋白β6亚基为目的基因设计7对siRNA干扰分子。根据siRNA的筛选原则，筛选出对β6受体基因具有干扰作用的siRNA，并合成shRNA。构建了7个干扰载体。将鉴定正确的干扰载体大提质粒，并用乙醇沉淀的方法纯化、浓缩质粒。利用组织块法和酶消化法分离怀孕32天的皮特兰猪胚胎成纤维细胞，用20%FBSDMEM培养基于5%CO2培养箱内培养。利用X-tremeGENEHPDNA转染试剂盒将干扰质粒转染至猪胚胎成纤维细胞和BHK细胞中，通过荧光倒置显微镜观察PEF细胞内干扰质粒绿色荧光蛋白的表达情况。利用实时定量（qRT-PCR）技术对每个干扰载体进行效果验证。将干扰效果好的载体酶切后，连接至PXL-EGFP-NEO整合载体上，大提质粒，乙醇纯化浓缩后转染PEF细胞。对转染后的细胞进行G418筛选，获得纯化后的PEF细胞，并大量扩繁。qRT-PCR检测整合载体的抑制效果及病毒复制量，并进行攻毒检测。结果：在NCBI上搜索获得猪整联蛋白β6亚基的基因序列，其序列编号为EF432729，并将其与鼠源整联蛋白β6亚基基因序列在DNAMAN上比较，其同源性为84.75%，而在靶区域的同源性为93.55%。针对靶区域设计合成了7对siRNA，并构建了7个干扰载体，分别命名。通过测序获得正确的干扰载体。大量提取干扰载体质粒，并利用乙醇沉淀技术纯化质粒，并将其浓缩至3000ng/μL以上。分离得到的PEF细胞于F1代冻存，共72管，保存于液氮罐中。将干扰质粒转染至F2代PEF细胞。通过对转染条件的优化，获得相对较高的转染效率。提取转染干扰质粒的PEF细胞RNA，反转录为cDNA，利用qRT-PCR技术分析干扰质粒抑制猪整联蛋白受体β6亚基的表达情况，并筛选出pGsi-Z4干扰效果较好的质粒，其干扰效果为91.7%。构建具有较好干扰效果的整合载体，依据PXL-EGFP-NEO整合载体上neo抗性，利用G418筛选转染后的PEF细胞，并大量扩繁。利用qRT-PCR分析整合载体的干扰效果。转染后36h，其抑制细胞受体效果较好。进行攻毒实验，并通过qRT-PCR分析病毒复制量。结果显示，在攻毒后24h和36h，可以减少病毒的复制。结论：针对猪整联蛋白受体β6亚基胞浆域设计siRNA，在PEF细胞内，最终获得了干扰效果较好的pGsi-Z4载体，其能够有效的抑制受体β6亚基基因的表达，减少了病毒侵入细胞内的数量，从而发挥抑制病毒在胞内大量复制的作用。在利用该载体阻断BHK细胞β6基因表达时，pGsi-Z4的siRNA与靶位点存在一个碱基的差异，因此并不能达到较理想的效果。而pGsi-Z5与靶位点则完全同源，在BHK细胞内可以发挥一定的抑制作用。构建的整合载体在转染后36h干扰效果相对较好。在检测病毒的实验中，感染后24h和36h表现出相对较好的减少病毒复制的效果。