抗新城疫病毒中药组方的筛选及其抗病毒机制的初步研究

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鸡新城疫是由新城疫病毒(NDV)引起的一种急性、热性和高度接触性传染病,具有很高的发病率和病死率,是危害养禽业的一种主要传染病,给养禽业带来了巨大的损失,OIE将其列为A类疫病。尽管疫苗接种是最普遍的预防措施,但是免疫鸡群的感染给新城疫的防治带来了严峻挑战,因此,免疫接种以外的抗病毒治疗药物研究也成为当前应用研究的热点,尤其是药残较低的抗病毒中药倍受业界关注。近年来的研究表明许多中药及其成分具有抗病毒活性,筛选具有抗NDV的中药成分配伍后选择抗病毒作用更强的组方,对新城疫的防治具有重要意义,组方的抗病毒机制研究对于解释中药的抗病毒作用具有重要参考价值。本研究应用细胞培养和MTT法对安全浓度范围内的黄芩苷、氧化苦参碱、三七总皂苷、黄连小檗碱、菊花总黄酮、绿原酸、板蓝根多糖、黄芪多糖、板蓝根生物碱和淫羊藿多糖10种中药成分用细胞培养法进行抗病毒筛选,以评价各中药成分抵抗新城疫病毒感染的能力。结果表明,多数中药成分均对病毒有抑制作用,其中黄芩苷、氧化苦参碱、三七总皂苷、菊花总黄酮抑制作用较强。为发挥中药配伍作用筛选抗新城疫病毒作用较强的中药组方,从筛选出的具有抗病毒作用的中药成分三七总皂苷、菊花总黄酮、黄芩苷、氧化苦参碱、板蓝根生物碱、黄芪多糖及板蓝根多糖中,选取三种中药成分按照一定比例组成中药组方进行抗病毒筛选。结果表明,组方1、5、6、7、9、10具有较好的抗病毒作用,并且不同的加药方式及药物浓度均对其抗病毒能力有一定的影响。通过用细胞培养法筛选出具有较强抗新城疫病毒的6个中药组方,为进一步验证其在体内的抗病毒作用,应用鸡胚接种测定血凝价对其进行验证。结果表明各组方试验组的血凝价显著低于病毒对照组,同时还与同浓度的单药成分相比呈现差异显著或极显著,说明各中药组方不仅有较好的抗病毒作用,而且比单药成分效果更强。另外,加药方式及组方浓度均对其抗病毒能力有一定的影响。为进一步研究中药抗新城疫病毒的作用机制,采用MTT法和ELISA方法,测定筛选出的6个中药组方对鸡外周血淋巴细胞增殖及其IL-2、IFN-γ细胞因子分泌情况的影响。结果表明6个中药组方均不同程度地促进淋巴细胞的增殖并且不同浓度下促进效果不同。另外,6个组方还能促进淋巴细胞分泌IL-2、IFN-γ,同时也受到组方浓度的影响。
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