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蜘蛛丝具有质量轻、强度高及韧性大等优越特性，由于其开发利用难度大，因此借助生物工程技术生产蛛丝原材料成为首选方法。八聚体蛛丝蛋白基因是由人工合成的拟蜘蛛拖丝蛋白基因的核心序列S连接成的八聚体(Spidroinl8，8S)，为了进一步探究8S基因的功能及特性，本实验构建了毛囊细胞中特异性表达8S基因的载体，并转染了小鼠表皮细胞和绒山羊胎儿成纤维细胞，验证了启动子的表达能力;通过转染小鼠胚胎干细胞获得阳性克隆，为嵌合体小鼠的制备奠定基础，并运用原核注射方法，制备了8S转基因小鼠，为研究8S对毛发特性的影响提供了研究基础。 1.8S基因毛囊特异性表达载体pCDsR-K8SP的构建 通过PCR扩增出PolyA片段，连接到载体pMD19T-8S上构成中间克隆载体pMD19T-8S-PolyA。分别用KpnⅠ和SalⅠ将其与带有毛囊特异性启动子的载体pCDsR-KAP6-1-IGFⅠ双酶切后，重组成8S基因的毛囊特异性表达载体pCDsR-K8SP，经酶切鉴定与测序分析，结果与预期设计相符。 2.8S基因毛囊特异性表达载体pCDsR-K8SP的细胞转染及鉴定 在脂质体的介导下，将毛囊特异性表达载体pCDsR-K8SP分别转染入小鼠表皮细胞和绒山羊胎儿成纤维细胞中，经双重筛选获得阳性克隆。对转基因细胞基因组进行PCR特异性扩增检测，结果表明外源目的基因8S已稳定整合到转基因细胞基因组中。提取筛选得到的转基因小鼠表皮细胞及绒山羊胎儿成纤维细胞的总RNA，进行反转录PCR检测，结果表明外源基因8S在这两种转基因细胞中均呈现表达阳性。 3.8S转基因小鼠胚胎干细胞的获得及转基因小鼠的制备 通过转染小鼠胚胎干细胞，获得了外源基因8S已稳定整合到转基因细胞基因组中的阳性克隆，为下一步制备嵌合体小鼠奠定基础。同时使用载体pCDsR-KSSP对小鼠受精卵进行原核注射，获得67只待检原代小鼠，经PCR鉴定，共检测出6只8S转基因阳性小鼠，阳性得率为8.96％。本实验中8S转基因小鼠的制备及初步鉴定，为进一步研究人工合成蛛丝蛋白的特性以及利用生物工程方法开发蛛丝新型材料提供了研究基础。