在番茄果实的发育成熟过程中，乙烯起着重要的调控作用，而Le-EIN3蛋白质是番茄乙烯信号转导途径上一个重要的转录因子，番茄 EIL3 基因的表达能够活化已知的乙烯传导过程，并启动一系列由乙烯调节的目标基因的表达，它对乙烯反应起正调控作用。番茄EIN3的作用和调控机制并不完全清楚，为了能够对番茄果实发育成熟机理进行深入的研究，克隆番茄 EIL3 基因并表达、纯化该蛋白具有十分重要的意义， 番茄 EIL3 基因在GenBank中的序号为AF328786，其编码序列全长为1844bp。经同源分析，该基因序列与烟草的EIL3基因序列具有 79％的同源性，与拟南芥EIN3、EIL1、EIL2和EIL3的同源性分别为59％、56％、52％、46％。根据番茄EIL3基因序列设计引物，PCR扩增EIL3目的基因。经酶切、连接、转化等操作构建pET15b-EIL3、pET30a-ElL，3和pPIC9k-EIL3这三种表达载体，并通过PCR快速检测、酶切检测、测序等方法对阳性克隆子进行了鉴定检测。将pET15b-EIL3、pET30a-EIL3转化进入BL21大肠杆菌，构建成两种原核表达工程菌，然后采用IPTG诱导的方式诱导外源蛋白质的表达，并通过SDS-PAGE、ELISA等方法对诱导表达结果进行鉴定检测；将pPIC9k-EIL3转化进入KM71酵母菌，通过G418多拷贝筛选和SDS-PAGE电泳的方法筛选了4株表达效率较高的pPIC9k-EIL3/KM71表达工程菌，采用甲醇诱导的方式诱导表达外源蛋白质，通过SDS-PAGE、EIJSA方法检测诱导表达结果；研究结果表明，真核表达工程菌表达效率远远高于原核表达工程菌。选用一个重组酵母菌株进行扩大诱导培养，采用镍离子亲和层析的方法对番茄EIN3重组蛋白质进行分离纯化，并用SDS-PAGE和EIJSA方法对纯化产物进行了鉴定检测，最终获得了分子量大小为71 kD的高浓度和纯度的番茄EIN3重组蛋白质，