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目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）复合骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells，BMSCs）对β射线皮肤损伤创面愈合的影响及机制的研究。方法：1．选用清洁级6-8周龄雄性SD大鼠3只，颈椎脱臼法处死。在无菌条件下获取股骨、胫骨，并收集骨髓，采用密度梯度离心法和贴壁培养法分离培养骨髓间充质干细胞，传代细胞生长至第3代，用DiI标记细胞，制备BMSCs(浓度为1×106/ml)细胞悬液。2.选用清洁级3月龄雌性SD大鼠60只，应用直线加速器产生的β射线（45Gy）单次照射大鼠臀部皮肤40mm×30mm，建立急性深Ⅱ度β射线皮肤损伤动物模型。随机分为3组：bFGF+BMSCs复合治疗组（A组）、BMSCs治疗组（B组）、生理盐水对照组（C组）。A组，n=20，创面出现后将BMSCs细胞悬液(浓度为1×106/ml)1ml注入大鼠创面皮下及真皮层，单次注射，并定期向创面喷洒bFGF。B组，n=20，创面出现后仅给予注射BMSCs细胞悬液，方法同A组。C组，n=20，创面出现后给予注射生理盐水。每周观察创面愈合情况，且在无菌条件下切取创面组织5mm×5mm，采用光镜、免疫组化等方法检测，分别于治疗后第1、3、5周观察各组大鼠创面组织病理学变化和bFGF、VEGF表达的动态变化。结果：1.骨髓间充质干细胞的培养与观察：原代细胞经过24h培养后可见大量细胞贴壁生长，6-8d后细胞生长进入指数生长期。传代细胞生长至第3代，用DiI标记BMSCs，在荧光显微镜下可观察到呈红色荧光的细胞。将细胞注入大鼠创面，24小时后，荧光显微镜下仍能观察创面组织切片中被DiI标记的BMSCs。2.创面观察：大鼠照射后2周开始脱毛，3周局部皮肤出现红肿、水疱，4周出现创面，且逐渐增大，5周创面不再增大。①创面愈合时间：A组：30.40±1.52天，B组：38.81±2.80天，C组：45.62±3.95天。A治疗组创面愈合时间明显较其余两组快（P<0.05），B治疗组较C组创面愈合时间快（P<0.05）。②光镜观察：观察各组创面组织中的表皮细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞数量，A组明显多于B、C两组，B组多于C组。③免疫组化显示：治疗后第1、3、5周bFGF、VEGF阳性细胞光密度值A组明显高于B、C两组（P<0.05），B组高于C组（P<0.05）。结论：1.应用直线加速器建立β射线皮肤损伤创面动物模型方法简便、剂量准确、可靠。2. BMSCs体外培养生长稳定，传代后仍保持未分化状态。DiI标记BMSCs稳定、可靠，可以做BMSCs示踪研究。3. bFGF复合BMSCs能促进β射线皮肤损伤创面的愈合，明显缩短创面愈合的时间。4、bFGF复合BMSCs促进β射线皮肤损伤创面的愈合,其机制是：bFGF通过促进BMSCs向血管内皮细胞、表皮细胞、成纤维细胞等分化，增加创面局部组织中修复细胞数量, BMSCs又能促进VEGF、bFGF等生长因子的分泌，两者具有协同作用，加速β射线皮肤损伤创面的愈合。