兔AMPD1基因RT-PCR定量表达及其与肌苷酸含量的相关性分析

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanyouzhu
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以天府黑兔和哈尔滨大白兔为实验材料,首次克隆了兔肌苷酸(IMP)代谢合成相关候选基因AMPD1;采用实时荧光定量PCR和高效液相色谱法测定了AMPD1及最长肌中的肌苷酸含量在两个品种及三各日龄阶段中相对表达量的变化,研究AMPD1在骨骼肌中的表达量对IMP含量的影响;测定了两品种肉兔的8项肉质指标并进行比较,结果如下:测定的兔部分AMPD1基因序列为899bp,对其核苷酸序列进行同源性分析表明,兔AMPD1基因与人类、牛、野猪和鼠类的同源性较高,达89.4%~92.5%。比较两个品种肉兔在三个日龄阶段的IMP含量,发现IMP的含量变化与日龄存在极显著的关系(P<0.01),而IMP含量变化与品种的关系不显著(P>0.05)。随着日龄的增长,IMP的含量呈下降趋势,且天府黑兔背最长肌的IMP含量在不同日龄阶段都普遍高于哈白兔的IMP含量,但是差异不显著(P>0.05)。天府黑兔90日龄的AMPD1mRNA的表达量最低,分别为40日龄和70日龄的46.79%(P<0.01)和51.52%(0.05>P>0.01)。40日龄较70日龄的AMPD1mRNA的表达量高10.10%(P>0.05);哈白兔90日龄的AMPD1mRNA的表达量最低,分别为40日龄和70日龄的53.06%(0.05>P>0.01),59.10%(0.05>P>0.01)。并且天府黑兔的AMPD1mRNA的表达量在三个日龄均高于哈白兔。日龄分别与AMPD1基因的表达量和IMP的含量呈极显著的负相关;品种与AMPD1基因的表达量和IMP的含量无相关;AMPD1基因的表达量与IMP含量之间存在极显著正相关。品种,日龄,AMPD1基因的表达量对IMP的含量的直接作用分别为:P0.1=0.107,P0.2=-0.373,P0.3=0.335,以日龄的影响极为显著。日龄对IMP含量的直接作用最大,P0.2=-0.373;AMPD1基因的表达量通过品种、日龄对IMP的含量的间接作用之和最大为0.271。说明日龄对IMP含量的直接影响更大,而AMPD1基因的表达量对IMP的含量更主要为间接影响。分析肌内脂肪(IMF)和肌苷酸(IMP)含量与部分肉质性状的相关性,结果表明:IMP含量与肌纤维直径呈极显著负相关(r=-697,P<0.01)、与RMR呈显著负相关(r=-0.451,0.05>P>0.01)、与WBSF呈负相关关系(r=-0.398,P>0.05);IMF含量与肌纤维直径呈正相关关系(r=0.399,P>0.05)、与RMR呈正相关关系(r=0.391,P>0.05);IMF和IMP含量都与pH不相关。各项肉质指标经过分析结果表明,天赋黑兔背最长肌中pH相对较高,腿肌中的pH相对较低,且pH的下降速度较哈白兔慢;天府黑兔的肉色相对较暗红;天府黑兔的熟肉率较哈白兔高,但滴水损失较哈白兔低,即说明天府黑兔的肉品保水性好;天府黑兔的IMP含量和IMF含量相对较高,说明其肉品风味、口感更好,但肌纤维较粗,嫩度较差。
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