对虾是重要的水产养殖品种之一，但自九十年代以来在全球范围一直被病害(主要是病毒病)所困扰，到目前为止仍未找到很有效的方法来防治。对虾无特异性免疫系统，它主要依靠其体内的众多免疫因子来抵抗疾病的侵袭。本论文的目的是克隆对虾抗病因子并探讨其功能和作用机理，以期对对虾的病害防治有所帮助。 通过荧光mRNA差异显示技术(DD-PCR)，对正常斑节对虾和抗病斑节对虾进行分析，获得了9个差异cDNA片段。将它们重扩增后标记为探针，与两种虾的RNA进行杂交鉴定，其中有两个呈阳性，显示确有差异。经测序和同源性分析，有一个(命名为DDB，约450bp)被初步证明为与抗病相关的基因片段。 用λZAP Express载体分别构建了正常虾和抗病虾肝胰腺的cDNA表达文库，经鉴定其各项指标(包括滴度、库容量、重组率和插入片段长度等)后表明，这两个文库都是合格的，可用于对虾基因的克隆和研究。 通过从抗病虾文库DNA中直接扩增、筛cDNA库和5’-RACE三种方法相结合，获得了差异基因DDB的全长cDNA(包括5’和3’-UTR，共约800bp)，并预测了一个ORF(510bp，编码氨基酸170个)。同时发现其ORF和3’-UTR基本保守，而5’-UTR则具有可变性。 将此差异基因的ORF插入原核表达载体pThioHisC中，获得了高效重组融合表达，其表达产物量超过细胞总蛋白的10％。利用Ni亲和层析柱将表达产物进行了纯化，纯化效率达95％以上，再利用分步透析进行了纯化蛋白的成功复性。同时纯化了一个空载pThioHisC表达的对照蛋白。最后通过细胞实验，证实了差异基因的重组表达产物具有抗病毒作用，而又对细胞无毒。 将重组差异蛋白免疫小鼠，制备其抗体。通过蛋白A亲和柱从抗血清中纯化出IgG，再将其偶联至CNBr活化的Sepharose，制备成抗体亲和层析柱。然后通过亲和层析从对虾中分离出了天然差异蛋白，并经Western杂交证实。同时分离出了天然差异蛋白的一种可能的结合因子，证明了这个结合因子是一种凝集素，它与细菌表面成分LPS有很强的结合能力。对这个结合因子进行了串联质谱分析，获得了它的部分氨基酸序列。 利用免疫电镜技术对差异蛋白在对虾体内的分布进行了初步定位。发现它主要分散于细胞质中，但并非结合于某一细胞器上，而核内基本未发现其存在。在WSBV病毒颗粒上未发现其存在，说明此差异蛋白并非与病毒直接结合。 此差异基因是从对虾中获得的第一个具有抗病毒功能的基因。它在对虾体内的表达和调控以及差异蛋白的抗病机制有待继续研究.