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对坐叶是茜草科耳草属（Hedyotis）植物长节耳草（Hedyotis uncinella Hook.et Arn.）的干燥全草,是贵州省的少数民族用药,产于海南、广东、湖南、贵州、台湾和香港等地,国外分布于印度。对坐叶被广泛用于治疗癌肿、风湿、痢疾、腹泻、毒蛇咬伤和肝炎等疾病。对坐叶具有很高的药用价值,目前已经被开发为中成药上市。贵州百花医药股份有限公司生产的解毒止泻片是对坐叶单方制剂,该药具有清热解毒、利湿止泻的功效,用于胃肠湿热所导致的腹泻、腹胀、腹痛、急性肠炎等。另外,贵州家诚药业有限公司生产的解毒止泻胶囊也是以对坐叶为原料的单方制剂。对坐叶的质量直接关系到解毒止泻片的临床疗效与安全。然而,到目前为止,国内外对于对坐叶的化学成分研究尚不足,对于药材以及其化学成分的药理活性研究更为欠缺。对坐叶药材缺乏简便准确可靠的质量控制标准,仅2003版《贵州省中药材、民族药材质量标准》收载对坐叶,以齐墩果酸作为指标性成分,采用薄层扫描色谱的方法进行含量测定。因此,本课题的意义在于,在明确对坐叶活性成分的基础上,找出对坐叶药材的质量控制指标性成分,采用HPLC修订对坐叶的药材质量标准,制定可靠准确简便的质量控制方法,为对坐叶药材及其单方制剂的质量控制提供依据。本课题采用多种分离纯化方法,如硅胶薄层色谱、凝胶色谱、MCI、制备高效液相色谱、制备TLC等,对对坐叶的二氯甲烷部位和乙酸乙酯部位进行系统的化学分离,得到纯度较高的单体化合物。通过多种现代光谱联用技术,比如1H-NMR谱、13C-NMR谱、DEPT谱、二维谱、圆二色谱、旋光色谱、IR等,对分离得到的单体进行结构鉴定。从对坐叶中分离得到41个化合物,其中10个木质素类化合物,12个芳香类化合物,4个香豆素类化合物,3个三萜及甾体类化合物,12个其他类化合物。其中,DZY-9和DZY-10为新化合物,属于木质素类化合物。除了DZY-27DZY-29,其他化合物均为首次从对坐叶中分离。本课题考察了37个单体化合物对TNF-α诱导的人宫颈癌细胞株Hela细胞NF-κB表达的抑制活性,结果显示DZY-9（（7R,8S）-balanophonin）、DZY-27（ursolic acid）和DZY-28（oleanolic acid）对NF-κB表达有一定的抑制活性,且呈浓度依赖关系。MTT实验结果表明DZY-9（（7R,8S）-balanophonin）、DZY-27（ursolic acid）和DZY-28（oleanolic acid）对NF-κB的抑制活性不是由化合物的毒性引起的。本课题还考察了37个单体化合物的抗菌活性,依据CLSI（美国临床和实验室标准协会）操作规程,采用肉汤稀释法,选用鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer CI1410）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus CI0809）、猪链球菌（Streptococcus suis CI1407）、大肠杆菌（Escherichia coli CI1401）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa CI1011）、嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila CI1004）、沙门氏菌（Salmonella gallinarum CI0812）、无乳链球菌（Streptococcus agalactiae CI1302）、副溶血弧菌（Vibrio Parahemolyticus CI1456）、表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis CI1112）和粪肠球菌（Enterococcus faecalis CI1102）,以环丙沙星为对照物。实验结果表明DZY-19对嗜水气单胞菌（A.hydrophila CI1004）有明显的抗菌活性,DZY-33对鸭疫里默氏杆菌（R.anatipestifer CI1410）有明显的抗菌活性。本课题对对坐叶进行了质量控制研究,以齐墩果酸和熊果酸作为对坐叶的指标性成分,采用HPLC对其进行了含量测定,并对其进行了系统的方法学考察,包括:线性、精密度、重现性、准确度、稳定性、检测限和定量限。最后,根据含量测定的结果制定了合理的含量限度,建立了简便准确可控的药材质量控制方法。