白毛藤生物碱抗菌抗病毒及免疫药理学研究

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【研究背景】 我国是农业大国,畜牧业正蓬勃发展。但近几年来一些畜禽细菌性、病毒性疾病和某些人畜共患病给养殖业和人们的身体健康带来了严重威胁。目前用于畜牧业的药物和饲料添加剂,大部分都是抗生素类药品。近年来,人们意识到使用抗生素使药物残留越来越严重,已经造成了对环境的污染,并影响到人们的身体健康。而且抗生素的滥用容易使病菌产生耐药性,降低治疗效果。中草药具有毒副作用小、药物残留低、不易产生耐药性等特点,是真正的环保型药品。于是,人们纷纷把目光投向中草药资源的开发。我国虽然拥有世界上品种最多、数量最大的中草药资源,但是还有很多中草药未得到合理开发和充分利用。因此,合理地开发和利用我国中草药资源具有重要意义和光辉的前景。目前,国内外对中草药的研究也越来越多,已有研究表明白毛藤具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤和增强免疫的作用。但对白毛藤的研究不够深入,尚无人提取白毛藤中的总生物碱,有关白毛藤生物碱的药理作用研究更未见报道。 【目的】 (1) 探索白毛藤生物碱的提取工艺;(2) 评价白毛藤生物碱的安全性;(3)测定白毛藤生物碱的抗菌及抗病毒活性;(4) 探讨白毛藤生物碱对机体免疫功能的影响。 【方法】 (1) 采用醇提法从白毛藤中提取脂溶性生物碱和水溶性生物碱,并用改良寇氏法测定其对小鼠的LD50及对小鼠血液生理生化指标的影响; (2) 采用杯碟法测定其体外抗菌效果,并采用对倍稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC); (3) 测定其对鸡胚成纤维细胞的最大无毒浓度(TD0)、半数中毒浓度(TD50)、抑制50%细胞病变的药物浓度(IC50)和治疗指数(TI),应用先加药物后接种病毒、先接种病毒后加药物、病毒和药物同时加入、病毒和药物体外作用2h后再同时加入四种方式测定了生物碱的体外抗NDV效果; (4) 将BALB/c小鼠随机分成4组:白毛藤生物碱高(H组)、中(M组)、低(L组)三个剂量组和生理盐水对照组(C组),连续腹腔注射7d后,检测小鼠单核巨噬细胞吞噬功能、二硝基氟苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型变态反应(DTH)、胸腺指数和脾脏指数,并用RT-PCR的方法检测脾脏IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-α mRNA表达水平。
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