烙灸对脊髓损伤大鼠内源性神经干细胞相关因子影响

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目的通过脊髓损伤模型研究烙灸对脊髓损伤大鼠运动及感觉功能,损伤局部微环境及内源性神经干细胞相关因子的影响。方法采用自制Allen’s打击器制备SCI模型。实验大鼠分为假手术组(A组)、单纯损伤组(B组)、西药地塞米松组(C组)、烙灸治疗组(D组),每组10只分别在第7d、14d、28d、42d、56d采用BBB评分、Reuter评分法判断损伤后大鼠肢体功能恢复情况。各组剩余大鼠分别在第7d、14d、28d取损伤段脊髓组织,用于电镜观察脊髓损伤后超微结构,Western blot蛋白检测及实时荧光定量PCR检测。结果(1)BBB评分、Reuter评分表明D组大鼠烙灸后肢运动状态,肢体感觉优于B组、C组大鼠(P<0.05),疗效明显。(2)电镜观察脊髓超微结构变化,结果显示B组、C组及D组在脊髓损伤后均出现神经元细胞出现肿胀,髓鞘板层崩解,轴索分离,但经过28天烙灸治疗后,D组神经元细胞出现周围出现大量突触小泡,髓鞘结构变得清晰,呈洋葱样排列,而C组治疗神经元细胞恢复状况差于D组。(3)Western blot检测结果显示,术后7天,A组APC蛋白,B组GFAP蛋白含量高于其他组;术后14天,B组APC蛋白表达量下降,C、D组APC蛋白表达量上升,各组Nestin蛋白均有所增加;术后28天,GFAP蛋白中C组与D组蛋白含量表达低,C组与D组差异有统计学意义(P<0.05)。Nestin蛋白表达中,D组蛋白表达高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,D组APC(Nestin)蛋白浓度高于B组和C组(P<0.05),经过28天治疗D组GFAP蛋白浓度低于C组(P<0.05)。结论烙灸能促进脊髓损伤大鼠后肢运动和感觉功能的恢复。在烙灸干预下可以激活内源性神经干细胞并促进其增殖分化,抑制星形胶质细胞过度增加,从而修复大鼠受损神经细胞功能。
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