点击化学合成方法是近年来有机合成领域的一个研究热点，其特点是高效、无副反应。本论文应用点击化学反应致力于合成新型的β-环糊精衍生物固定相，并在高效液相色谱(HPLC)中考查所制备的固定相对各类手性化合物的拆分能力。　　首先，我们制备了一种结构明确的对氯苯基氨基甲酸酯化β-环糊精，并应用点击化学合成方法将其键合到炔端基化硅胶表面得到了一种新型的手性固定相。采用湿法装柱技术，用甲醇作为顶替液，制备了对氯苯基氨基甲酸酯化β-环糊精手性柱。考查了对氯苯基氨基甲酸酯化β-环糊精手性柱的柱效和拆分能力，在流动相为正己烷/异丙醇=90/10(V/V)，流速为0.5ml/min的条件下，其理论塔板数可以达到9.1×103/m。在甲醇为流动相条件下，一种名为4-苯基-2-恶唑烷硫酮(外消旋)在手性柱上的分离度可达1.76；通过对手性柱进行定期评价我们考查了手性固定相的稳定性，发现在将近半年的时间内柱效及其手性拆分能力基本没有什么改变，证明合成的手性固定相的稳定性较好。　　另外，本文还详细研究了温度、PH值、进样量、流速、反相条件下甲醇含量对手性拆分效果的影响，为建立和优化手性HPLC分析条件奠定了基础。在反相条件下，随着流动相中甲醇含量的增加，溶质的保留因子随之减小，分离度随之逐渐增大或逐渐减小；随着流速的增大和温度的升高，溶质的保留因子和分离度都随之减小；进样量越大，溶质分离度减小，峰形变差；因此适当减小流速和进样量有利于溶质与固定相之间的手性识别，获取更好的分离度；在流动相中加入适量的缓冲液，使得流动相PH值在3-6之间，有利于弱酸性溶质与固定相之间的手性识别作用。