目的:本研究探讨以同种异基因型的C6胶质瘤细胞及其裂解物与同基因型的9L胶质瘤细胞裂解物作为免疫原的疫苗对大鼠胶质瘤的治疗作用,以及经该疫苗治疗后大鼠胶质瘤组织的侵袭力变化情况,以期为胶质瘤的免疫治疗提供更多的可行性方案。方法:(1)采用立体定向技术,将1×10~6/10μl个9L胶质瘤细胞悬液注入Fisher 344大鼠右侧尾状核区,建立9L/Fisher 344大鼠胶质瘤原位模型。(2)接种后的大鼠随机分为三组:空白组,二十万单位治疗组,三十万单位治疗组,每组各10只。其中空白组大鼠不接受治疗;二十万单位治疗组大鼠皮下注射以C6细胞(2×105个)、C6细胞裂解物(含2×105个细胞)及9L细胞裂解物(含2×105个细胞)作为免疫原的疫苗;三十万单位治疗组大鼠皮下注射以C6细胞(3×105个)、C6细胞裂解物(含3×105个细胞)及9L细胞裂解物(含3×105个细胞)作为免疫原的疫苗。所有治疗均于接种9L细胞后第1天进行。(3)以50天为大鼠生存观察期,记录其生存状况及生存时间。于接种9L细胞后第10、20、30、40、50天对所有大鼠行MRI检查,动态观察大鼠胶质瘤体积变化情况。接种9L细胞后第20天,各组随机处死1只大鼠行HE染色及免疫组化Podoplanin、Fascin染色,以观察大鼠胶质瘤组织病理及侵袭能力改变情况。结果:(1)以50天为大鼠生存观察期,空白组的生存率为0;二十万单位治疗组大鼠的生存率为89%;三十万单位治疗组大鼠的生存率为100%。治疗组大鼠生存时间比空白组显著延长,差异有统计学意义(P<0.05);二十万单位治疗组与三十万单位治疗组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)所有大鼠增强MRI检查均可见右侧尾状核区明显强化,本次实验制模成功率为100%。MRI动态检查发现,随瘤龄增加,空白组大鼠胶质瘤呈现持续增大,而治疗组大鼠胶质瘤呈现先增大后减小的生长趋势。接种9L细胞第20天时,计算各组肿瘤体积:空白组大鼠胶质瘤体积为(451.25±9.36)mm3,二十万单位治疗组大鼠胶质瘤体积为(122.52±22.30)mm3,三十万单位治疗组大鼠胶质瘤体积为(112.06±17.97)mm3。单因素方差分析证明空白组大鼠胶质瘤体积明显大于治疗组,差异具有统计学意义(P<0.05);二十万单位治疗组与三十万单位治疗组之间比较,差异无统计意义(P>0.05)。(3)HE染色可见,空白组大鼠胶质瘤细胞密度高,排列紧密,呈巢状,部分区域伴有出血、坏死及新生血管;治疗组大鼠脑胶质瘤组织的肿瘤细胞密度稍低,典型巢状排列及新生血管少见。免疫组化Podoplanin及Fascin染色可见,空白组大鼠Podoplanin及Fascin呈强阳性表达,而在治疗组中,Podoplanin及Fascin表达均降低,且Podoplanin染色的降低程度比Fascin更加显著;二十万单位治疗组与三十万单位治疗组之间相比较,均能观察到少量的胶质瘤细胞表达Podoplanin及Fascin,两者之间无明显差异。结论:本研究成功建立9L/Fisher 344大鼠脑胶质瘤模型,并于接种后第1天予以同种异基因型的C6胶质瘤细胞及其裂解物与同基因型的9L胶质瘤细胞裂解物作为免疫原的疫苗进行治疗。实验结果证明了该疫苗能够打破荷瘤机体对自身肿瘤的免疫耐受,诱导荷瘤机体的抗肿瘤免疫反应,防止免疫逃避的发生,延长荷瘤大鼠生存时间并降低胶质瘤组织侵袭力。