申克孢子丝菌分子生物学鉴定、分型及其与孢子丝菌病临床型别关系研究

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目的 1.探索一种简单、快速的申克孢子丝菌的鉴定方法。 2.了解申克孢子丝菌的基因学特征,进行基因分型,研究不同地域分布和不同临床型别来源的申克孢子丝菌基因间的关系。 3.探讨具有基因差异的申克孢子丝菌致病力与孢子丝菌病不同临床型别关系。 材料与方法 一.实验材料 1.实验菌株.56株分别来源于不同国家、地区以及不同临床型别孢子丝菌病的申克孢子丝菌以及9个其他临床上较重要的真菌菌种。 2.实验动物:108只雄性BALB/c小鼠,体重22-24g,8-10周,购自辽宁省实验动物中心。小鼠被随机分为二大组,每大组54只,每大组又分为9小组,每小组6只,分笼喂养。 二.实验试剂 1.基因组DNA提取主要试剂 1.1 基因组DNA提取液CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide 十六烷基三甲基溴化铵) 1.2 20μg/ml RNA酶A。 2.PCR-RFLP主要试剂 2.1 真菌通用引物ITS1和ITS4 2.2 限制性内切酶HaeⅢ 3.RAPD主要试剂
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