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目的:①研究再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)患者PIG-A基因的突变及与AA发病的关系。②检测AA患者外周血白细胞上糖基磷脂酰肌醇锚蛋白的表达,初步探讨PIG-A基因突变与CD55、CD59的表达变化的关系。③检测AA患者血浆IL-3、IL-8水平的变化,探讨免疫调节因素在AA发病中的作用。 方法:流式细胞术检测 AA患者白细胞上 CD55、CD59的表达;饱和酚抽提法提取基因组DNA,PCR扩增AA患者PIG-A基因外显子(exon)2,exon4,exon5,过柱法纯化PCR产物,并将纯化的PCR产物送检测序;定量酶免疫法测定对照组和实验组血浆中IL-3、IL-8的水平。 结果:①30例AA患者中有14例患者发生了PIG-A基因的突变,共发现43个突变位点,其中11例患者基因突变主要发生在exon2上,exon4及exon5上出现突变的患者各有5例。②AA患者PIG-A基因突变类型主要是单碱基的替代,43个突变位点中,除碱基插入、碱基缺失各2个外,其余均为碱基替代,占总突变的90.70%。其中腺嘌呤(A)与鸟嘌呤(G)之间的碱基替代发生频率最高,达23.26%;胞嘧啶(C)与 G之间的碱基替代发生频率最低,仅为2.33%。C与胸腺嘧啶(T)之间碱基替代有87.5%为错义突变;C与G之间的碱基替代为同义突变。43个突变位点共引起28个氨基酸的改变。③AA患者白细胞CD55表达率(89.56%±9.23%)与正常对照(97.68%±1.52%)相比显著性降低(P﹤0.05)。AA患者 CD59的表达率(90.44%±11.75%)与正常对照(97.77%±1.59%)相比无显著性差异(P﹥0.05)。④AA患者血浆中IL-3(28.33 ug/ml±8.34 ug/ml)水平与正常对照组(32.39 ug/ml±7.15 ug/ml)相比无明显差异(P﹥0.05)。AA患者血浆IL-8(40.63 ug/ml±27.10 ug/ml)水平与正常对照(23.25 ug/ml±5.67 ug/ml)相比明显升高,差别具有统计学意义(P﹤0.05)。无PIG-A基因突变组血浆IL-8(60.02 ug/ml±22.94 ug/ml)水平明显高于PIG-A基因突变组(19.07 ug/ml±6.77 ug/ml)(P﹤0.01)。 结论:①30例AA患者中有14例发生PIG-A基因的突变(突变率为46.67%),提示PIG-A基因的突变与AA的发病有一定联系。②AA患者PIG-A基因突变位点主要集中于exon2上。突变类型以碱基替代为主(90.70%),腺嘌呤与鸟嘌呤之间的碱基替代发生频率最高, exon5上发生错义突变的频率最高。③AA患者外周血白细胞表面锚蛋白 CD55的表达明显低于正常对照,差别具有显著性;AA患者外周血白细胞表面锚蛋白CD59的表达与正常对照相比无显著性差异。④AA患者血浆IL-8水平明显增高,无PIG-A基因突变组患者血浆IL-8水平明显高于PIG-A突变组。