泸州是四川省烟草主要种植区之一,常年烟草种植面积达10余万亩,每年收获烟叶约1000多万公斤。病毒病作为泸州烟区主要病害,其发生流行严重影响烟区的发展,已成为目前泸州烟草生产的主要限制因子。明确泸州烟区主要病毒病种类及分布,构建泸州烟区烟草病毒病综合治理技术体系意义重大。在四川省泸州市叙永县、古蔺县各烟站分别于烟草的苗期、团棵期、旺长期、成熟期采集的若干份表现花叶型、畸形、闪电斑型、脉坏死型、蚀刻型、环斑型等症状的疑似病毒病样品进行鉴定。首先提取被测样品RNA进行反转录,用Tobamovirus、Potyvirus、CMV和TSWV的通用引物通过RT-PCR的方法对采集到的样品进行检测,对检测到条带的cDNA继续进行RT-PCR扩增后回收,连接T载体,挑取大小适宜的菌落进行摇菌培养,菌液PCR验证后送生物工程(上海)有限公司测序,对测序返回的结果在NCBI中运用BLAST进行比对,确认在泸州烟区检测到了6种病毒,分别为烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、马铃薯A病毒(Potato virus A,PVA)、烟草脉带花叶病毒(Tobacco vein banding mosaic virus,TVBMV)以及辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV)。其中TMV分布最广,在两个县各烟站均有分布,是泸州烟区主要病毒,其次是PVY,以古蔺县发生更普遍,而CMV、PVA、TVBMV和ChiVMV分布较少,只有零星发生。ChiVMV在我国烟草产区仅云南有报道,其它烟草种植区未曾发生。本文对四川省首次发现并采集到的ChiVMV进行了深入研究,通过RT-PCR及RACE法对ChiVMV进行全长序列扩增,得到一条9726 bp的全长序列(GenBank登录号为:MK 405594)。通过对序列分析及进化树比对发现,该序列与来自四川辣椒上的两个分离物ChiVMV-Yp8和ChiVMV-Pp4亲缘关系最近,核苷酸和氨基酸同源性均达98%以上,推测侵染烟草的ChiVMV可能来源于辣椒。将ChiVMV汁液摩擦接种到番茄、普通烟、心叶烟、辣椒、洋酸浆等鉴别寄主上,除不侵染心叶烟外,其余几种寄主植物均表现明显症状,并能成功检测到ChiVMV。在泸州烟区进行了高效抗病毒诱导药剂的筛选试验,于烟叶苗期、大田期分别进行喷雾处理,连续施药两次,结果表明6%寡糖·链蛋白1000倍液、8%宁南霉素水剂1000倍液和2%嘧肽霉素水剂1000倍液田间防治效果较好,但供试各药剂间防效差异不显著。综合以上研究结果和生产实际经验,结合泸州烟区自然生态环境,针对泸州烟区病毒病发生特点,建立了泸州地区烟草病毒病综合治理技术体系:以TMV和PVY为主要防控靶标,加强病毒病源头控制,阻断CMV、PVY等病毒病的虫媒传播途径,选用无病毒苗生产技术、虫媒阻隔技术和免疫诱抗技术为关键控制技术,同时结合农业防治、生态工程控害、测报预警、精准施药等,提出了从播种前的准备、栽培过程中各项操作注意事项到采收后的集中处理等系列操作规程,以此来确保病毒病综合治理技术的落实,降低病毒病危害。