围手术期应用槐耳颗粒诱导的食管癌肿瘤细胞凋亡及对患者免疫功能影响的研究

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目的:食管癌治疗以手术为主,辅以放化疗。近年来的研究表明,许多抗肿瘤药物均可诱导肿瘤细胞凋亡,诱导肿瘤细胞凋亡成了抗肿瘤药物研究的新方向。同时,随着现代肿瘤免疫理论的发展,人们也开始注意到恶性肿瘤患者常伴有免疫功能低下,手术和全身麻醉能够加剧患者免疫功能紊乱。免疫功能严重紊乱可以造成癌细胞(或手术残存癌细胞)的扩散,应及时给与抗肿瘤药物抑制癌细胞扩散。但是,某些常规应用的化疗药物由于细胞毒性较大,限制了其在手术前后的应用。中药是众多抗肿瘤药物中的一类,除具有一定的抗肿瘤效果外,常具有免疫调节作用。唐《新修本草》中记载:槐耳是生长在中国古槐树上的一种天然菌,早在1500年前已做为药用。槐耳学名为Trametes robiniophila Murr.,中名为槐栓菌,属担子菌亚门,多孔菌科,栓菌属。据南京中医药大学研究报道,人工培育提取的槐耳颗粒具有抗肿瘤作用,可以诱导肿瘤细胞凋亡,并具有免疫调节功效。本研究测定手术前服用槐耳颗粒后食管癌患者肿瘤细胞的凋亡效果,检测患者的免疫力,观测手术前后及应用槐耳颗粒后患者的免疫功能变化;监测应用槐耳颗粒组患者外周血白细胞变化。通过本研究,试图对槐耳颗粒的抗肿瘤机制有进一步了解,对槐耳颗粒引起的肿瘤细 中文摘要胞凋亡和对患者免疫力的影响进行观察研究,为临床制定手术前后合理用药提供理论依据;同时通过监测食管癌思者手术前后免疫功能的变化,进一步明确手术对机体的免疫影响。 材料与方法:本研究对象选取2000年8月至2002年1 月期间河北医科大学第四医院住院的食管癌病人40例,均经病理证实,中度分化,分期均为*—Ill期(根据pTNM分期),临床检查未发现远处转移癌灶,经左胸第6、7肋床进胸行食管癌切除术,麻醉药用异氟醚麻醉,全身麻醉,手术中未输血。随机分为两组,对照组20例,手术前至手术后本实验结束未给与任何化疗及调节免疫的药物;试验组20例,手术前给予口服槐耳颗粒,20克/次,3次/日,15天一20天,手术后 8天继续日服,20克/次,3次/日,直至30大(一个疗程卜试验组和对照组男女各对半。手术前未用药时,取静脉血,用T细胞嗜银染色法测定T细胞Ag-NORS含量,用SAP法测定T细胞亚群,并查外周血白细胞数目;手术后第14天、40天再分别取静脉血测T细胞Ag-NORS含量、T细胞亚群和外周血白细胞数目。手术中留取新鲜肿瘤标本1刀克,用 70%酒精固定,0—4 oC保存,用流式细胞仪测肿瘤细胞凋亡率。并取新鲜肿瘤组织用4%戊二醛固定,电镜观察细胞凋亡的形态改变。肿瘤细胞凋亡用凋亡细胞百分比表示,外周血T细胞Ag-NORS用银染核仁面积/细胞核面积百分比表示(I沼%),T细胞亚群用染色阳性细胞/细胞总数百分比表示,外周血白细胞用个几表示。 结果:l、应用槐耳颗粒组(试验组肿瘤细胞凋亡率 中文摘要 为**士2.9)%,未应用药物组(对照组凋瘤细胞凋亡率为 (.2士2.6)%,两者相比有显著差异o<0.05卜2、电镜下 观察,试验组肿瘤细胞有较明显肿瘤细胞凋亡改变,对 照组肿瘤细胞凋亡不明显。3、试验组患者手术前外周血 T淋巴细胞邮-NORs为(5.12士 0.72)O,而对照组手术前 外周血 T淋巴细胞 AgNORS为*刀9士 0.gi)%,两者相比 无显著差异o>0.05);试验组手术前T细胞亚群中CD寸 细胞为O.l士 10.3)o,CDS“细胞为O0.4土 9.l)O, CD4VCDS”为1.03士O.25;对照组手术前CD4“为Og.3士 9.9)O,CDS”为(.3土10.5)%,CD4“/CDS”为l.00士0.40。 两组CD4”、CDS”、CD4”/CDS“相比无显著差异(P均 功.05卜4、试验组手术后第14天外周血T淋巴细胞旭- NORS为*刀2士 l.00)%,对照组为** 4士 0.84)%,两者 相比无显著差异o功.05);试验组手术后14大*D4\ CDS”、CD4”/CDS”分另为(41.6士 8.6)O、O 5.4士 12.7)O, 1.23士O.36;对照组手术后第N 天CD4”、CDS”、CD4VCDS“ 分别为(4.3士7.9)o、OS.1士12.4)O、l.15士0.29,两组 **4“、*08”、*04”/08“相比无显著差异瞩均>0刀5)。5、 试验组手术后第40大外周血T淋巴细胞Ag-NORS为*.84 士 0.9 l)O,对照组为(5.sl士 0.77)o,两者相比无显著差 异0>0*5);试验组手术后4o大**4“、*08“、*04”亿*” 分别为(47.7士4.8)%、OO.2士5.6)%、1.61士0.26;对照组 手术后第’0天co’“、cos“、co’+/C+/Cos”分别为(’.s土 5.8)%、(27.7士6.3)%、1.73士0.39,两组 CD4”、CDS“、 *D4“C*8”相比无显著差异o均>o.05卜6、对照组外周 血T淋巴细胞Ag-worn、co?
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