【摘 要】
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目的研究姜黄素联合顺铂能否增强顺铂对A549人肺腺癌细胞、LLC-1鼠源肺癌细胞以及LLC-1肺癌小鼠的抗肿瘤作用、减轻LLC-1肺癌小鼠由顺铂引起的肾毒性,并进一步探讨其作用机制。方法体外实验:将A549、LLC-1肺癌细胞分为Control组,DDP 13.3μmol组,DDP 13.3μmol+Cur 10μmol/L组,DDP 13.3μmol+Cur 20μmol/L组,DDP13.3μ
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目的研究姜黄素联合顺铂能否增强顺铂对A549人肺腺癌细胞、LLC-1鼠源肺癌细胞以及LLC-1肺癌小鼠的抗肿瘤作用、减轻LLC-1肺癌小鼠由顺铂引起的肾毒性,并进一步探讨其作用机制。方法体外实验:将A549、LLC-1肺癌细胞分为Control组,DDP 13.3μmol组,DDP 13.3μmol+Cur 10μmol/L组,DDP 13.3μmol+Cur 20μmol/L组,DDP13.3μmol+Cur 40μmol/L组,DDP 13.3μmol+Cur 80μmol/L组,MTT检测A549、LLC-1肺癌细胞的细胞活力;运用线粒体膜电位及流式细胞术检测A549、LLC-1肺癌细胞的凋亡情况;通过划痕实验检测A549、LLC-1肺癌细胞的迁移情况;应用ELISA法检测A549、LLC-1肺癌细胞上清液中炎症因子的含量。体内实验:48只C57雄性小鼠成功接种LLC-1鼠源肺癌细胞后,随机分为Control组,DDP 5mg/kg,DDP+Cur低剂量组(5mg/kg+Cur 50mg/kg),DDP+Cur中剂量组(5mg/kg+Cur 100mg/kg),DDP+Cur高剂量组(5mg/kg+Cur 200mg/kg),DDP+P38抑制剂组(5mg/kg+SB203580 1.4mg/kg),每组8只,连续给药14天,测量小鼠瘤重,计算抑瘤率;全自动生化分析仪检测小鼠全血细胞计数、肾生化指标;HE染色法观察肿瘤、肾脏组织的病理变化;ELISA法检测肾脏组织中谷胱甘肽、丙二醛的含量;Western Blot检测肾脏组织中P38、P-P38蛋白表达情况。结果体外实验:与对照组相比,DDP可以抑制A549、LLC-1肺癌细胞的增殖,并降低细胞活力,降低A549、LLC-1肺癌细胞线粒体膜电位,促进细胞调亡,升高细胞凋亡率,降低A549、LLC-1肺癌细胞的迁移能力,同时降低A549、LLC-1肺癌细胞上清液中TNF-α和IL-6的含量。与DDP组相比,Cur和DDP的联合应用可以进一步增强DDP对A549、LLC-1肺癌细胞的抑制作用,降低A549、LLC-1肺癌细胞的线粒体膜电位,促进细胞凋亡,抑制A549、LLC-1的迁移,降低A549、LLC-1肺癌细胞上清液中TNF-α和IL-6的含量。体内实验:与对照组比较,DDP可以降低肺癌小鼠体重,抑制肿瘤生长,肿瘤和肾脏组织HE染色发现肿瘤细胞坏死增多,肾组织结构有所损伤,各项血细胞计数下降,血肌酐和尿素氮的含量升高,肾组织中GSH含量下降,MDA含量升高,P38及P-P38蛋白表达上调。与DDP组比较,Cur与DDP的联合应用可以增加肺癌小鼠的体重并进一步升高抑瘤率,肿瘤和肾脏HE染色显示肿瘤坏死面积进一步增大,肾脏组织病理损伤情况减少,各项血细胞计数有所升高,血肌酐和尿素氮的含量降低,肾脏组织中GSH含量升高,MDA含量降低,并能降低P38及P-P38蛋白的活力,抑制P38、P-P38的表达。结论姜黄素与顺铂联合在体外可以增强顺铂对A549、LLC-1肺癌细胞生长的抑制作用,促进肿瘤细胞的凋亡,抑制细胞迁移及降低炎症因子的含量;姜黄素联合顺铂在体内可以增强顺铂对C57小鼠肿瘤生长的抑制作用,同时降低顺铂引起血液毒性和肾毒性,其减轻肾毒性的机制可能与下调P38、P-P38蛋白的表达有关。
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