本文以吸附层析为主,探索研究了适合于从红豆杉粗提物及内生真菌发酵液中分离纯化紫杉醇的技术。传统的液液萃取由于溶剂用量大、溶液易乳化等缺点限制了其在真菌发酵液中分离紫杉醇的应用。本文以树脂层析取代传统的液液萃取步骤,解决了上述不足。从六种树脂中筛选出了吸附性能最好的HZ818大孔吸附树脂,通过单因素及正交试验对工艺进行了优化。通过一步树脂层析可使原料中的紫杉醇同时达到脱色和纯化的双重目的。此步平均回收率在98%以上。以正相层析作为整体工艺的第二步。研究了硅胶及碱性氧化铝两种介质柱的层析效果。通过考察洗脱液组成、洗脱液强度、洗脱速率、高径比等因素对两种柱进行了对比,其中样品经氧化铝层析后,紫杉醇含量有所增加,这主要是由于氧化铝的催化作用,使其它某些紫杉烷类物质转化成了紫杉醇。树脂处理后的样品再经氧化铝层析后纯度达到30%,平均回收率在125%左右。最后一步采用C18反相层析对前两步纯化得到的产品进行精制,通过优化层析洗脱剂组成、洗脱剂强度、洗脱方式以及进料量等操作条件,采用双柱串联的方法,得到纯度在93-94%的紫杉醇,再继以结晶重结晶步骤,除去少量杂质得到纯度在98%左右的紫杉醇晶体。经本工艺分离纯化后的紫杉醇总回收率约为88%。采用波长扫描、高压液相及质谱对制得产品进行鉴定,结果与文献上报道得紫杉醇性质一致。