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AtGASA6基因是拟南芥GASA(GA stimulated transcripts in Arabidopsis)基因家族成员,具有保守的家族成员结构特征,本论文主要对AtGASA6在植物生长发育以及对抗逆境胁迫中的功能进行了研究,得到如下主要结果:
1、利用RT-PCR和GUS染色技术研究AtGASA6的时空表达模式,结果表明,AtGASA6能够在根、茎、叶、花中表达:伴随种子的萌发,AtGASA6在胚轴和胚根处的转录活性逐渐增强:幼苗阶段,AtGASA6的转录主要发生在细胞分裂和有机物运输活跃的部位,如主根和侧根的分生组织,或者下胚轴、子叶、真叶、茎的维管组织:此外,AtGASA6启动子驱动的GUS基因在发育的胚珠中也有很强的表达。
2、构建好35S∷GASA6∷EGFP表达载体后,分别通过在洋葱表皮细胞和拟南芥根细胞中表达AtGASA6∷EGFP融合蛋白,观察AtGASA6∷EGFP的亚细胞定位情况。结果表明,AtGASA6∷EGFP融合蛋白主要定位在细胞壁以及胞外基质区域,这与生物信息分析推测的结论相同,AtGASA6蛋白是分泌型的细胞壁蛋白。
3、在种子萌发和幼苗生长阶段,AtGASA6的转录活性同时受到GA、ABA和糖信号的调控,GA正调控AtGASA6的表达,ABA和糖信号负调控AtGASA6的表达。同时,GASA6超表达转化植株对6%葡萄糖胁迫、6%蔗糖胁迫和ABA信号的敏感性显著减弱,而GASA6超表达转化植株对GA信号则表现得更为敏感,AtGASA6可能同时影响了GA、ABA和糖信号对种子萌发和幼苗生长的调控。
4、综合激素和糖对AtGASA6表达的影响,以及通过RT-PCR技术获得的分子水平证据来分析,AtGASA6可能分别受到GA信号转导途径核心组分DELLA、ABA信号转导途径核心组分ABI5和糖信号转导途径核心组分HXK1的调控,在调节种子的萌发和幼苗生长的过程中发挥重要作用。
5、与野生型植株相比,超表达AtGASA6的植株体内可溶性糖含量显著升高而T-DNA插入突变植株的可溶性糖含量较低,据实验结果推测AtGASA6可能影响了植株体内的糖代谢过程。